苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．如图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因).据图回答下列问题．(1)将图中①的DNA用HindⅢ.BamHⅠ完全酶切后.反应管中有种DNA片段．(2)图中②表示HindⅢ与BamⅠ酶切.DNA连接酶连接的过程.此过程可获得种重组质粒,如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切.目的基因与质� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．如图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（amp^r为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题．

（1）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有

种DNA片段．
（2）图中②表示HindⅢ与BamⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得

种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得

种重组质粒．
（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的

．
（4）图中②过程所用的酶为

，作用部位为

．
（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡．而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞

．
（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的

基因频率的增长速率．

考点：基因工程的原理及技术,转基因生物的安全性问题

专题：

分析：1、“分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的．
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．
2．“分子缝合针”--DNA连接酶
（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T₄DNA连接酶．
（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．

解答： 解：（1）图①中，从苏云金杆菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3种DNA片段．而质粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2种DNA片段，其中有1种与目的基因相同，所以反应管中有4种DNA片段．
（2）因HindⅢ切出的末端与BamHⅠ切出末端不同，所以用DNA连接酶连接形成的重组质粒有2种；而BstⅠ与BamHⅠ切出的末端相同，所以用DNA连接酶能连接形成1种重组质粒．
（3）质粒要能进行复制才能得到更多的表达产物，所以构建基因表达载体后，不能影响质粒的复制．
（4）图中②过程所用的酶为DNA连接酶，作用部位为两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（5）生物的细胞表面的受体具有特异性，人类肠上皮细胞没有昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，所以该毒素蛋白对人类的风险相对较小．
（6）转基因与非转基因作物混种，可降低抗性作物对害虫的选择性，使害虫种群中的抗性基因频率增长率减慢．
故答案为：
（1）4
（2）2 1
（3）复制
（4）DNA连接酶磷酸二酯键
（5）表面无相应的特异性受体
（6）抗性

点评：本题考查了基因工程的原理和技术的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．

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