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    11．利用基因工程技术培育转基因抗冻番茄，该过程需要用多种限制酶，如图依次表示EcoR I、Sma I、Nae I三种限制酶的识别序列及切割位点，

    请回答：
    （1）上述限制酶在特定位点切割DNA，其实质是断开DNA分子每条链中特定部位的两个核苷酸之间的
    磷酸二酯键，切割后产生了黏性末端和平末端末端．
    （2）利用EcoR I 和Nae I酶切得某种鱼的抗冻蛋白基因，可与被EcoR I 和Sam I酶切后的质料连接成重组质料，原因是相同的黏性末端之间可连接，且不同的平末端之间也可以连接．
    （3）重组质粒导入番茄后，欲检测抗冻蛋白基因是否转录出mRNA，需利用标记的含有目的基因的DNA片段（或“标记的抗冻蛋白基因”或“标记的含有目的基因的DNA单链”）作探针．
    （4）利用抗冻蛋白制备出相应的抗体，然后进行抗原-抗体杂交，观察到杂交带出现，尚不足以确定转基因抗冻番茄培育是否成功．因此，还应将转基因番茄置于寒冷环境培养（或进行个体水平检测或进行抗冻实验），以确定其耐寒能力是否提高．
    （5）应用PCR扩增目的基因时，需要在基因组数据库中查询目的基因的核苷酸（或脱氧核苷酸或碱基）序列，以便合成引物．PCR过程第一轮循环的模板是目的基因的两条脱氧核苷酸链（或目的基因）．

    分析 1、基因工程的工具：
    （1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
    （2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
    （3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
    2、基因工程技术的基本步骤：
    （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，产生黏性末端和平末端．
    （2）EcoRⅠ酶切出粘性末端，SmaⅠ和NaeⅠ酶切出平末端，利用EcoRⅠ和NAE酶切得某种鱼的抗冻蛋白基因，可与被EcoRⅠ和SamⅠ酶切后的质粒连接成重组质粒，原因是相同的黏性末端之间可连接，且不同的平末端之间也可以连接．
    （3）欲检测目的基因是否转录出mRNA，需利用标记的含有目的基因的DNA片段作探针，进行核酸分子杂交，若出现杂交带，说明目的基因是否转录出了mRNA．
    （4）利用抗冻蛋白制备出相应的抗体，然后进行抗原-抗体杂交，观察到杂交带出现，尚不足以确定转基因抗冻番茄培育是否成功．因此，还应进行个体生物学水平的鉴定，将转基因番茄置于寒冷环境培养，以确定其耐寒能力是否提高．
    （5）应用PCR扩增目的基因时，需要在基因组数据库中查询目的基因的核苷酸（或脱氧核苷酸或碱基）序列，以便合成引物．PCR过程第一轮循环的模板是目的基因的两条脱氧核苷酸链（或目的基因）．
    故答案为：
    （1）磷酸二酯键     黏性末端和平末端
    （2）相同的黏性末端之间可连接，且不同的平末端之间也可以连接
    （3）标记的含有目的基因的DNA片段（或“标记的抗冻蛋白基因”或“标记的含有目的基因的DNA单链”） 
    （4）抗体      置于寒冷环境培养（或进行个体水平检测或进行抗冻实验）
    （5）核苷酸（或脱氧核苷酸或碱基）       目的基因的两条脱氧核苷酸链（或目的基因）

    点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够掌握基因工程的操作步骤，识记基因工程的操作工具及作用，能够结合图示以及所学知识准确答题，难度适中．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    3．2016年世界艾滋病日主题：携手抗艾，重在预防．艾滋病是一种危害性极大的传染病，病因是由于患者感染艾滋病病毒（HIV）引起．回答下列问题：
    （1）从免疫学角度分析，艾滋病是一种免疫缺陷病，艾滋病的传播途径有血液传播、性传播、母婴传播（至少答出两个）．
    （2）作为一种逆转录病毒，HIV在逆转录酶的作用下完成逆转录过程．
    （3）HIV具有的损害机体抵抗力的巨大效应在于：HIV入侵人体后与T细胞相结合，并对其形成破坏，从而逐渐导致免疫能力降低．最终使人无法抵抗其他病原体的入侵．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    4．我国西南地区分布着典型的热带常绿阔叶林，森林中自下而上分布着草本植物、灌木和乔木等，植物的这种分层为动物提供了多种多样的栖息空间和食物条件．请回答下列问题：
    （1）森林中自上而下这种明显的分层现象，形成了群落的垂直结构，群落中物种数目的多少称为物种丰富度．
    （2）当森林遭受持续的干旱气候时，树林往往扩展根系的分布空间，以保证获得足够的水分，维持生态系统正常的功能，这种现象反映出生态系统本身对外界干扰具有一定的抗性 （生态系统具有抵抗力稳定性、生态系统具有一定的自我调节能力）．
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    1．已知人体内有兴奋性神经递质与抑制性神经递质．通常一个神经元只释放一种神经递质．如图为人手意外触到蜡烛火焰引起的屈肘反射示意图，a-e表示不同神经元．请回答下列问题：

    （1）图中神经元a产生的兴奋传到神经末梢时，引起突触前膜内的突触小泡释放（兴奋性）神经递质，与神经元b细胞膜上的（特异性）受体结合，使神经元b兴奋，神经元b的神经冲动进一步引起神经元c兴奋，最终引起屈肌收缩．
    （2）若刺激神经纤维上的N点，神经元b无电位变化，原因是兴奋在神经元之间只能单向传递；发生屈肘反射时伸肌舒张，神经元d兴奋而神经元e未兴奋，其原因可能是神经元d释放抑制性神经递质使神经元e不兴奋，进而使伸肌舒张．
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    7．回答下列有关光合作用与呼吸作用的问题．
    Ⅰ．为探究油菜素内酯（BRs，一种植物激素）能否缓解弱光对番茄光合作用的影响，研究人员设计了A、B、C、D四组实验，实验处理及检测番茄叶片Rubisco（一种可催化CO2与C5反应生成C3的酶）活性、Rubisco基因表达量、净光合速率所得结果如下：
    A组：自然光照，Rubisco活性相对值为100%、Rubisco基因表达量相对值为100%、净光合速率相对值为100%；
    B组：自然光照、叶面喷施一定浓度BRs，Rubisco活性相对值为98.3%、Rubisco基因表达量相对值为102%、净光合速率相对值为99.2%；
    C组：弱光照（25%自然光照），Rubisco活性相对值为58.4%、Rubisco基因表达量相对值为35.0%、净光合速率相对值为57.2%；
    D组：弱光照（25%自然光照），叶面喷施相同浓度BRs，Rubisco活性相对值为89.2%、Rubisco基因表达量相对值为71.0%、净光合速率相对值为72.0%．
    请回答：
    （1）Rubisco在番茄叶肉细胞的叶绿体基质中发挥催化作用．
    （2）比较“A、C”或“B、D”组实验结果，表明弱光能导致番茄暗反应能力降低．
    （3）自然光照下，叶面喷施一定浓度BRs基本不影响（填“促进”、“抑制”或“基本不影响”）番茄光合作用；A、C、D三组实验结果相比表明，BRs可通过提高Rubisco活性和Rubisco基因表达量（或Rubisco活性和数量），从而缓解弱光对番茄光合作用的影响．
    Ⅱ．植物在光下吸收O2会产生CO2的现象称为光呼吸．
    （4）研究表明光呼吸会消耗光合作用新形成有机物的四分之一，因此提高农作物产量需降低光呼吸，某同学提出了如下措施：①适当降低温度②适当提高CO2浓度，不一定能达到增产目的措施是①（填序号），理由是温度降低，酶活性减弱，光呼吸减弱的同时光合作用也可能减弱，达不到增加作物产量的目的．

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    科目：高中生物 来源：2016届湖南省怀化市高三第二次教育质量监测理综生物试卷（解析版） 题型：综合题

    下面为生物技术实践的相关实验，请回答：

    （1）月季花的花粉在适宜的培养基上培养产生花粉植株的两种途径：一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株，另一种是花粉在诱导培养基上先形成 ，再将其诱导分化成植株。这两种途径之间的界限主要取决于培养基中的 。

    （2）在培养微生物的过程中，微生物接种最常用的方法是稀释涂布平板法和 ；无菌技术主要通过 处理来避免杂菌污染。

    （3）工业生产中，提取胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从大面积养殖的 中获得，三是利用微生物发酵生产。从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是 ， 胡萝卜素粗品的鉴定方法是 。

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    科目：高中生物 来源：2016届湖南省怀化市高三第二次教育质量监测理综生物试卷（解析版） 题型：综合题

    下图为体内细胞与内环境之间的物质交换示意图，据图回答问题：

    （1）此图表示了细胞与周围环境的关系，其中组成人体内环境的成分有 （填标号）。血浆、组织液和淋巴三者之间既有密切关系，又有一定区别．一般情况下，②与③成分上的主要区别是______。

    （2）物质进出细胞的方式有多种．以葡萄糖为例，葡萄糖从血浆进入红细胞的方式是 ；CO2不从毛细血管进入胰腺组织细胞的原因是 。

    （3）人体内环境能够维持动态平衡，当天气变得寒冷时，机体甲状腺产生的甲状腺激素增多，甲状腺激素的作用是 ；同时皮肤毛细血管收缩，骨骼肌战栗。这种调节机制属于 调节（神经调节 或 体液调节 或神经—体液调节）。

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    4．如图为脉胞霉体内精氨酸的合成途径示意图，下列有关说法错误的是（　　）
    A．若基因①不表达，则基因②、③、④也不表达
    B．若产生鸟氨酸依赖突变型脉胞霉，则可能是基因①发生突变
    C．精氨酸的合成说明基因与性状的关系并不都是简单的线性关系
    D．基因可通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而控制生物体的性状

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    5．下列选项中，含有相同元素的一组化合物是（　　）
    A．纤维素和尿素B．脂肪酸和磷脂
    C．三磷酸腺苷和核糖核酸D．胆固醇和血红蛋白

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