Question

（15分）电影中，“蜘蛛侠”能产生高强度的蜘蛛丝，现实中的基因工程也创造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。请回答：

（1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因最好从 （基因组/cDNA)文库中获取。若要获得大量的目的基因片段，可采用PCR技术进行扩增，扩增过程需使用 酶。

（2）在构建含蛛丝蛋白基因表达载体时，需使用的工具酶有限制酶和DNA连接酶，目的基因应与 基因的启动子等调控组件组合在一起，启动子是 识别和结合的位点；构建完成的基因表达载体需通过显微注射技术导人羊的 ，获得重组细胞。

（3）若所得到的“蜘蛛羊”乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，应先采用 技术检测“蜘蛛羊”乳腺细胞中是否含有 ；若已确认此步成功，则应该继续检测是否

Answer 1

（1）cDNA 热稳定DNA聚合（Taq）

（2）羊的乳腺蛋白 RNA聚合酶 受精卵

（3）DNA分子杂交 蛛丝蛋白基因（目的基因） 转录出了蛛丝蛋白的mRNA

【解析】

试题分析：（1）蛛丝蛋白基因是真核基因，为保证实验成功，目的基因最好从cDNA文库中获取。PCR技术进行扩增目的基因时需使用热稳定DNA聚合酶。

（2）根据题意，该基因工程中目的基因需要在羊的乳腺细胞内表达，所以构建基因表达载体时，需将目的基因与羊的乳腺蛋白基因的启动子等调控组件组合在一起；启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点；构建完成的基因表达载体需通过显微注射技术导人羊的受精卵，获得重组细胞。

（3）若所得到的“蜘蛛羊”乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，应先采用DNA分子杂交技术检测“蜘蛛羊”乳腺细胞中是否含有目的基因；若已确认此步成功，则应该继续检测是否转录出了蛛丝蛋白的mRNA。

考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。