Question

请回答下列有关问题：
（1）基因工程是一种

 

操作技术，需要借助限制酶、连接酶和载体才能进行．
（2）培育转基因生物的操作是：先通过各种方法获得目的基因，然后将目的基因与

 

所需要的多种原件组装起来构成一个

 

，再将其导入受体细胞，并使

 

．
（3）为获得纯度相对较高的DNA，某同学以鸡血为材料展开了实验探究，实验步骤如下：
a．取鸡血细胞悬液10mL，加蒸馏水20mL，同时用玻棒快速搅拌，过滤，取滤液，转移到塑料材质的大烧杯中
b．沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，用玻棒沿一个方向轻轻搅拌，同时不断收集析出的物质．
c．根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的曲线（如图）：
①如果只要收集纤维蛋白，可采取的措施是

 

．
②当硫酸铵溶液的饱和度最低约为

 

时，DNA的溶解度最小，与此同时析出的物质还有

 

．
③如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可采取的办法是

 

．（答出一点即可）

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,DNA的粗提取和鉴定

专题：

分析：基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品．
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．
DNA的粗提取与鉴定的实验原理：
（1）DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氧化钠的浓度的变化而改变的．当氯化钠的物质浓度为2 mol/L时，DNA的溶解度最大，浓度为 0.14mol/L时，DNA的溶解度最低．利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出． 
（2）DNA不溶于95%的酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液．利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA． 
（3）DNA中含有脱氧核糖，能与二苯胺（沸水浴）反应生成蓝色物质，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂．
3、凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据不同大小的蛋白质分子在凝胶柱中的不同移动速率而实现分离的．

解答： 解：（1）基因工程的操作对象是基因或DNA分子．（2）基因工程的一般步骤是：获取目的基因、构建基因表达载体、把目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，因此可以填上相应内容．
（3）①从实验结果可以看出，当硫酸铵浓度为30%时，开始析出球蛋白，因此需要控制硫酸铵浓度为30%之前收集纤维蛋白．
②从实验结果中可以看出，当硫酸铵浓度约为65%时，DNA全部析出，因此大约为65%时，DNA的溶解度最小，同时析出的物质还有纤维蛋白、球蛋白和少量的tRNA．
③提纯DNA，实际上就是把DNA与蛋白质分开，可以采用如下方法：DNA不溶于酒精，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取出含杂质较少的DNA；也可以用蛋白酶处理，使蛋白质水解；将溶有DNA与蛋白质的溶液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温一段时间，蛋白质变性析出，DNA不变性．
故答案为：
（1）DNA
（2）基因表达   表达载体    目的基因整合到受体细胞的DNA上
（3）①在硫酸铵浓度达到30%之前收集析出物
②65%    球蛋白、纤维蛋白（tRNA）
③将DNA与球蛋白的混合物加入到冷却酒精中，收集再次析出物；用嫩肉粉（木瓜蛋白酶）处理溶有DNA与蛋白质的溶液；将溶有DNA与蛋白质的溶液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温一段时间（答出一点即可）

点评：本题考查基因工程、DNA的粗提取和鉴定实验的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用．