Question

【题目】白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性的白细胞介素。

（1）为增加白细胞介素基因的数量，可使用_____________________技术，但前提是必须知道基因的已知序列，目的是__________________________________________。

（2）在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用_____________________处理酵母菌，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为_____________________。在表达过程中，启动子需与_____________________识别和结合，从而驱动转录过程。

（3）在体液免疫过程中，白细胞介素是由_____________________细胞分泌的，为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母细胞作为受体细胞，可能原因是_____________________。

（4）在分泌型表达载体和白细胞介素基因所在的DNA分子上均有多个限制酶的酶切位点，图示过程获得有效表达的重组栽体使用了EcoRl和EcoR52两种限制酶，比使用单一的限制酶，其优点是__________________________________________。

Answer 1

【答案】PCR 设计引物 Ca2+ 转化 RNA聚合酶 T淋巴 细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器 防止目的基因、表达载体发生自身环化或者防止目的基因反向接入到分泌型表达载体中

【解析】

分析题图，图示表示基因表达载体的构建过程，载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的切割位点，所以切割载体和目的基因时用限制酶EcoRⅠ与EcoR52，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体。

（1）基因工程中，扩增目的基因的方法为PCR技术，但前提是必须知道基因的已知序列，以便设计引物。

（2）在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用Ca2+处理酵母菌，使酵母菌称为感受态细胞，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化．在表达过程中，启动子需与RNA聚合酶识别和结合，从而驱动转录过程。

（3）在体液免疫过程中，白细胞介素是由T淋巴细胞分泌的；由于细菌属于原核生物，细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器，因此为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母细胞作为受体细胞。

（4）在分泌型表达载体和白细胞介素基因所在的DNA分子上均有多个限制酶的酶切位点，图示过程获得有效表达的重组栽体使用了EcoRl和EcoR52两种限制酶，比使用单一的限制酶，其优点是防止目的基因、表达载体发生自身环化或者防止目的基因反向接入到分泌型表达载体中。