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    9．农作物收获后，燃烧秸秆会造成大气污染，如何回收利用是我国面临的一个重要问题．某同学设计从土壤中分离纤维素分解菌→分解秸秆，获得糖液→发酵生产乙醇，从而实现再次利用，请回答以下问题：
    （1）将从土壤中获得的微生物培养在以纤维素为碳源，并在加入刚果红的培养基上筛选周围有透明圈的菌落．
    （2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法．采用固体平板培养细菌时，需要倒置培养，其原因是防止皿盖上凝结的水珠滴落在培养基上污染培养基．
    （3）发酵阶段需要的菌种是酵母菌，在产生乙醇时要控制的必要条件是无氧（密闭或密封）．

    分析 1、刚果红染色法特指纤维素的染色法，刚果红能与纤维素形成红色复合物，对纤维二糖和葡萄糖无作用；在含有纤维素的培养基中加入刚果红，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法生形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可用此来鉴别纤维素或纤维素分解菌的分解作用．
    2、分离纤维素分解菌的实验流程是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落．
    3、纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖．
    4、酵母菌在酒精发酵时一般将温度控制在18-25℃，需要进行无氧发酵．

    解答 解：（1）筛选纤维素分解菌时需要使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基．鉴定纤维素分解菌时可以进入刚果红染液，在含有纤维素的培养基中加入刚果红，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法生形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈．
    （2）微生物纯化时常用的接种方法是平板划线法或稀释涂布平板法．固体平板培养细菌时，为防止皿盖上凝结的水珠滴落在培养基上污染培养基，需要倒置培养．
    （3）糖液→发酵生产乙醇阶段需要的菌种是酵母菌．产生乙醇时要控制的必要条件是18-25℃，无氧条件．
    故答案为：
    （1）纤维素    刚果红  透明圈
    （2）平板划线法   稀释涂布平板法   防止皿盖上凝结的水珠滴落在培养基上污染培养基
    （3）酵母菌  无氧（密闭或密封）

    点评 本题主要考查纤维素分解菌的筛选与培养、酒精发酵等的知识，对相关知识点的识记和理解是解题的关键．

    练习册系列答案
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