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    （1）PCR是一种DNA体外扩增技术。㊣1988年，PCR仪问世，并被广泛应用于基因扩增和DNA序列测定。右图是PCR技术示意图，请回答下列问题：
















    ①标准的PCR过程一般分为　　　　　 、　　　　 、 　三大步骤。

    ②引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段　　　　　　 。

    ③将双链DNA　　　　　　　　　　 ，使之变性，从而导致　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

    ④引物延伸需提供　　　　　　　　　　 作为原料。

    （2）红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离 纯化 纯度鉴定。请回答下列有关问题：

    ① 样品处理，它包括　　　 、　　　 、收集血红蛋白溶液。

    ②收集的血红蛋白溶液在透析袋中经过透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是　　　 。透析的原理是　　　 。

    ③通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是　　　 。

    （1）

    ①变性    复性    延伸      ②单链DNA或RNA   ③加热到95℃   双链DNA分离成两条单链    ④四种脱氧核苷酸   

    （2）

    ① 红细胞的洗涤      血红蛋白的释放

    ②去除相对分子质量较小的杂质     透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在透析袋内

    ③通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    1970年，特明和巴尔的摩证实了RNA病毒能以RNA为模板合成DNA，并发现了催化此过程的酶。图为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请据图回答：

    (1)催化①过程的酶是______________________________________________________。

    (2)③过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90℃～95℃时才能完成，说明DNA分子具有________性。

    (3)由图中信息分析可知，催化②⑤过程的酶都是________，两者在作用特性上的区别是________________________。

    (4)江苏有一道凉菜——白斩鸡，鸡肉嫩而不韧、味美鲜香。其加工过程中添加了从木瓜中提取的酶制成的“嫩肉粉。”下列有关嫩肉粉的叙述中，正确的是(　　)

    A．“嫩肉粉”可能是通过催化细胞间的纤维素水解而实现“嫩肉”的

    B．与高温蒸煮相比，“嫩肉粉”是通过降低反应活化能而实现“嫩肉”的

    C．“嫩肉粉”应在蒸煮鸡肉时加入，才能实现“嫩肉”

    D．“嫩肉粉”是一种化工产品，不利于人体健康，实际应用中能少则少、能无则无

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    1970年，特明和巴尔的摩证实了RNA病毒能以RNA为模板合成DNA，并发现了催化此过程的酶。图为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请据图回答：

    (1)催化①过程的酶是______________________________________________________。

    (2)③过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90℃～95℃时才能完成，说明DNA分子具有________性。

    (3)由图中信息分析可知，催化②⑤过程的酶都是________，两者在作用特性上的区别是________________________。

    (4)江苏有一道凉菜——白斩鸡，鸡肉嫩而不韧、味美鲜香。其加工过程中添加了从木瓜中提取的酶制成的“嫩肉粉。”下列有关嫩肉粉的叙述中，正确的是(　　)

    A．“嫩肉粉”可能是通过催化细胞间的纤维素水解而实现“嫩肉”的

    B．与高温蒸煮相比，“嫩肉粉”是通过降低反应活化能而实现“嫩肉”的

    C．“嫩肉粉”应在蒸煮鸡肉时加入，才能实现“嫩肉”

    D．“嫩肉粉”是一种化工产品，不利于人体健康，实际应用中能少则少、能无则无

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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    2．(17分)(2012·南昌一模)尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：

    (1)如图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。除此方法外，常用的微生物接种方法还有________(写一种)。

    (2)如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行________，灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是______________________。

    (3)下面是两种培养基的配方：

    表1：A培养基配方

    KH2PO4

    Na2HPO4

    MgSO4·7H2O

    葡萄糖

    尿素

    琼脂

    H2O

    1.4 g

    2.1 g

    0.2 g

    10.0 g

    1.0 g

    15.0 g

    1 000 mL

    表2：B培养基配方

    纤维素粉

    Na2HPO4·

    NaNO37H2O

    KH2PO4

    MgSO4·7H2O

    KCl

    酵母粉膏

    H2O

    5 g

    1 g

    1.2 g

    0.9 g

    0.5 g

    0.5 g

    0.5 g

    1 000 mL

    ①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。

    a．倒平板　b．计算　c．溶化　d．称量　e．灭菌

    ②通常培养基采用____________法灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是________________________。

    ③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述________(A、B)配方的培养基，在该培养基中加入________指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。

    ④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是________。

    (4)如果进一步从尿素分解菌中提取出DNA，利用PCR技术扩增，则每次循环复制可分为________________三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它们能合成________，该物质被提取出后的纯化方法通常是____________________________________________________。

    (5)在微生物培养过程中，常需要对微生物进行计数，血球计数板是常用的工具，血球计数板的计数室长和宽各为1 mm，深度为0.1 mm，其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格位于计数室的____________________。下图表示的是其中一个中方格的情况，对该中方格中的酵母菌进行计数的结果是________个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数为20个，则1 mL培养液中酵母菌的总数为________个。

    (6)抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27 ℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图A)，继续在同样条件下培养3天，结果如图B。分析结果，得出的结论是(　　)

    ①甲菌产生了抗生素　②丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制　③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制　④丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长

    A．①③　　　　　　B．①④

    C．②③　　　　　　D．②④

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    科目：高中生物 来源：2010～2011学年黑龙江大庆铁人中学高二下学期期中考试生物试卷 题型：综合题

    回答有关PCR的问题：（1）多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：         

    A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现
    B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
    C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
    D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
    (2)图示样品DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增，可以获取大量DNA克隆分子。

    请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处：
    ①                                                                       
    ②                                                                       ③                                                                       。
    （3）你打算扩增下图所示的两段序列之间的 DNA ，请从所列出引物中选出合适的一对，
    5’-GACCTGTGGAAGC  CATACGGGATTG-3’
    3’-CTGGACACCTTCG  GTATGCCCTAAC-5’
    引物 1                       引物 2
    5’-GACCTGTGGAAGC        5’-CATACGGGATTG
    5’-CTGGACACCTTCG        5’-GTATGCCCTAAC
    5’-CGAAGGTGTCCAG        5’-GTTAGGGCATAC
    5’-GCTTCCACAGGTC        5’-CAATCCCGTATG
    答：引物 1 ：                         ；    引物 2 ：                        

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    科目：高中生物 来源：2010～2011学年黑龙江大庆铁人中学高二下学期期中考试生物试卷 题型：综合题

    回答有关PCR的问题：（1）多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：         

    A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现

    B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成

    C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

    D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高

     (2)图示样品DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增，可以获取大量DNA克隆分子。

    请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处：

    ①                                                                        

    ②                                                                        ③                                                                        。

    （3）你打算扩增下图所示的两段序列之间的 DNA ，请从所列出引物中选出合适的一对，

    5’-GACCTGTGGAAGC  CATACGGGATTG-3’

    3’-CTGGACACCTTCG  GTATGCCCTAAC-5’

    引物 1                        引物 2

    5’-GACCTGTGGAAGC        5’-CATACGGGATTG

    5’-CTGGACACCTTCG        5’-GTATGCCCTAAC

    5’-CGAAGGTGTCCAG        5’-GTTAGGGCATAC

    5’-GCTTCCACAGGTC        5’-CAATCCCGTATG

    答：引物 1 ：                         ；    引物 2 ：                        

     

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