Question

氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表。

 

图1

表　培养基的组成

液体培养基	蛋白胨	牛肉膏	氯苯	氯化钠	硝酸铵	无机盐(无碳)	蒸馏水
Ⅰ号	10 g	5 g	5 mg	5 g	－	－	1 L
Ⅱ号	－	－	50 mg	5 g	3 g	适量	1 L
Ⅲ号	－	－	20～80 mg	5 g	3 g	适量	1 L

(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的________。

(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是________。

(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于________培养基和________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是________。

(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为________。

　 (5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线(如图2)。从图2可知，SP1菌在________培养条件下最早停止生长，其原因是________。

 

Answer 1

(1)琼脂　(2)先调pH，后灭菌　(3)通用(基本)　选择　硝酸铵　(4)芽孢　

(5)20 mg/L氯苯　碳源最早耗尽

 

固体培养基中除添加营养成分外，还需要加入一定量的凝固剂，如琼脂；细菌培养的基本过程：配制培养基（称量→溶化→溶化→调pH→分装→加棉塞→包扎)→灭菌→搁置斜面→接种→培养(25℃下5～7 d或37℃下24 h)。根据培养基的用途可分为基本培养基、选择培养基和鉴别培养基等，题中Ⅰ号培养基属于基本培养基，由于Ⅱ号培养基中的碳源仅是氯苯，因此，培养基属于选择培养基。Ⅱ号培养基中仅硝酸铵含有氮元素，因此，它是该培养基中的氮源。细菌的休眠体是芽孢。根据曲线图可知，氯苯浓度为20 mg/L时，菌体数量最先减少，最可能是由于氯苯被耗尽。