Question

8．以下是花药培养和细菌培养的基本过程．请回答下列问题：

（1）选材时，确定花药中花粉的发育时期最常用的染色方法是醋酸洋红法；细菌培养中常用的接种方法是平板划线法活稀释涂布平板法．
（2）材料消毒时，用酒精和氢化汞溶液对花蕾处理后均需用无菌水冲洗，目的是终止消毒液对细胞的伤害；对培养基灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌；在接种过程中，对接种环和镊子等金属器具进行灭菌的方法是灼烧灭菌．
（3）在花药培养过程中，花粉可经过愈伤组织产生丛芽生根后发育成植株，还可经过胚胎体途径发育成植株；花药各阶段的培养基组分差异通常比细菌各代培养基的组分差异大（填“大”或“小”）．
（4）花药培养的目的是获得花粉植株，用于单倍体育种；细菌培养过程中，使用选择培养基的目的是筛选菌种．

Answer 1

分析 花药离体培养形成的是单倍体植株，对植物来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于单核期，因为单核期，细胞核由中央移向一侧的时期，花药培养成功率最高．选择花药时，确定花药发育时期最常用的方法是醋酸洋红法．某些植物的花粉不易着色需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色．花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30s→无菌水冲洗→吸干表面的水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4min→无菌水再冲洗3～5次．在无菌条件下剥离花药时要尽量不损伤花药（否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织），同时还要彻底除去花丝．因为花丝的存在不利于愈伤组织或胚状体的形成．实验流程为：材料的选取→材料的消毒→接种和培养→结果分析与评价．

解答 解：（1）单核期，细胞核由中央移向一侧时期的花粉对离体刺激敏感，可提高成功率．一般要通过镜检来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核用醋酸洋红进行染色．筛选和分离微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法．
（2）材料消毒时，为了终止消毒液对细胞的伤害，用酒精和氢化汞溶液对花蕾处理后均需用无菌水冲洗；培养基常用高压蒸汽灭菌方法进行灭菌．对接种环和镊子等金属器具用灼烧灭菌进行灭菌．
（3）花药培养产生花粉植株有两条途径：一是花粉通过胚状体阶段发育成植株；二是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株．
花药培养的各个阶段，培养基配方不完全一样，先是诱导愈伤组织的形成的，然后诱导生芽、诱导生根．通常比细菌各代培养基的组分差异大．．
（4）花药离体培养，可以获得单倍体植株．细菌培养过程中，选择培养的目的是以确保能够从样品中分离到所需的微生物，
故答案为：
（1）醋酸洋红法   平板划线法活稀释涂布平板法
（2）终止消毒液对细胞的伤害   高压蒸汽灭菌  灼烧灭菌
（3）胚胎体    大
（4）单倍体育种     筛选菌种

点评 本题考查了花药离体培养材料的选择、培养基中激素的作用等相关知识，意在考查考生对于植物组织培养的理解、识记和运用能力，难度中等．