【题目】Ⅰ．下图a表示基因工程中经常选用的载体——pBR322质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了检查载体是否导人原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌，将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上。得到如图b的结果（黑点表示菌落）。再将灭菌的绒布按到图b的培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布平移按到含圆环素的培养基上培养，得到如图c的结果（空圈表示与b对照无菌落的位置）。据此分析并网答下列问题：
（1）pBR322质粒的基本组成单位是_________。该基因工程中，质粒上的Ampr、Tetr称为____________基因。
（2）与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型可以推知，目的基因插入了_______中。
Ⅱ．下图是转基因大豆的培育过程，据图回答下列问题：
（3）重组质粒构建过程中，需要的酶有________________。
（4）据图可知，将目的基因导入大豆细胞的方法是_________。该法将外源基因插入到_________上，转入农杆菌，最终，插入到大豆细胞中染色体的DNA上。科学家通过PCR技术可获得大量该外源目的基因。该技术操作流程的三个重要步骤是_______________。
（5）可采用________技术，检测转基因大豆染色体的DNA上是否插入了图的基因；也可以采用____________的方法，检测目的基因是否翻译成蛋白质。
【答案】脱氧核糖核苷酸 标记 Tetr 限制酶和DNA连接酶 农杆菌转化法 Ti质粒的T-DNA 变性、复性、延伸 DNA分子杂交 抗原——抗体杂交
【解析】
1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原——抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2、分析转基因大豆的培育过程题图：①表示用限制酶切割Ti质粒的T-DNA，产生粘性末端；②基因表达载体的构建，形成重组质粒；③将重组质粒导入农杆菌细胞；④把被农杆菌感染的的普通大豆外植体采用植物组织培养技术，得到转基因大豆。
Ⅰ．（1）质粒是双链环状DNA分子，其基本组成单位是脱氧核糖核苷酸。该基因工程中，质粒上的Ampr、Tetr称为标记基因，可用于筛选含有目的基因的受体细胞。
（2）将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上，得到如图b的结果（黑点表示菌落），再将灭菌的绒布按到图b的培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养，得到如图c的结果，则与图c空圈相对应的图b中的菌落能抗氨苄青霉素，但不抗四环素，这说明目的基因插入了Tetr中。
Ⅱ．（3）重组质粒构建过程中，需要的酶有限制酶切割运载体和目的基因，需要用DNA连接酶把切割后的运载体和目的基因连接起来形成基因表达载体。
（4）据图可知，将目的基因导入大豆细胞的方法采用的是农杆菌转化法。该法将外源基因插入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA上，最终依靠T-DNA，插入到大豆细胞中染色体的DNA上。PCR技术操作的三个重要步骤分别是变性、复性、延伸。
（5）检测转基因大豆染色体的DNA上是否插入了目的基因，可采用DNA分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质可采用抗原——抗体杂交技术。
心算口算巧算一课一练系列答案
应用题作业本系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】Ⅰ．为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图A 所示的实验。
（1）同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是_________，出现图B结果可能的失误操作是____________。纯化菌株时，还可釆用平板划线法。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有____________。
（2）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将lmL样品稀释100倍，在3 个平板上分别接入0．lmL稀释液；培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为____________个。
Ⅱ．贵州知名品牌“老干妈”系列产品一直沿用传统工艺精心酿造，其中风味豆豉深受大众喜爱，远销国内外。风味豆豉的主要工艺流程是：黄豆→洗净浸泡→煮熟→加适量盐→发酵→加入配料→装坛密封→成品。请回答下列问题：
（3）制作豆豉前期发酵的目的是让霉菌产生相应的酶，如蛋白质转变为小分子肽和氨基酸，脂肪转变为______________，使豆豉营养更加丰富，有利于健康。发酵过程中需采用人工培养纯净菌种，接种前随机选取若干灭菌后的平板，先培养一段时间目的是_______________________________________。
（4）豆豉制成成品后，需测定其亚硝酸盐含量，原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与_____________发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成_____________色染料。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
限制酶 | EcoR Ⅰ | BamH Ⅰ | Sau3AI | SmaⅠ |
识别序列及切割位点 |
|
|
|
|
（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割后，含有_______个游离的磷酸基团。
（2）根据限制酶识别和切割的位点，应选择_________________酶对质粒和含目的基因的外源DNA进行切割。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能用BamH Ⅰ切割，原因是____________________________________________。
（3）通过PCR技术扩增目的基因时，加入的引物有A、B两种，引物A、B序列设计的依据是_______________________，若该目的基因扩增4代，则需要消耗引物A____________个。
（4）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶，若只考虑DNA切段两两连接，则混合物中将形成_______种环状DNA。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了__________________________________。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】图1、图2为激素发挥调节作用的两种方式，下列有关叙述错误的是（ ）
A.结构d为受体，激素与受体d一结合，激素b即被灭活
B.胰高血糖素的调节方式如图1所示，其受体位于细胞膜上
C.表明细胞膜具有控制物质进出细胞以及信息交流的功能
D.性激素的调节方式如图2所示，其受体位于细胞内部
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】某科研小组研究某池塘内草鱼种群增长速率的变化规律（如图1，其中T2之前的数据丢失）和该草鱼种群同化量的分配及流向（如图2），下列叙述正确的是（ ）
A.T2--T4时间段内，种群数量呈“S”型增长；T4—T5时间段内，种群数量逐渐下降
B.当种群增长速率为m时，该草鱼的年龄组成为稳定型
C.图2中“？”代表的是草鱼种群产生的粪便中的能量
D.图2中两个营养级之间的能量传递效率为D/（A+B+C+D）
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】胸腺激素是胸腺分泌的一种多肽类激素，可以增强免疫细胞的功能，其分泌受多种激素控制，部分调节过程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A.人垂体细胞表面只含有促甲状腺激素释放激素受体和甲状腺激素受体
B.图示过程中既有正反馈调节又有负反馈调节，二者共同调节胸腺的发育
C.神经—体液—免疫调节网络能够维持机体内环境理化性质稳定不变
D.胸腺激素可诱导来自骨髓的造血干细胞分化成T细胞
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】红酸汤是苗族人民的传统食品，它颜色鲜红、气味清香、味道酸爽。以番茄和辣椒为原料的红酸汤制作流程如下。下列相关叙述中正确的是（ ）
A.红酸汤制作过程中用到的微生物主要是醋酸菌
B.装坛时加入成品红酸汤是为了增加发酵菌种的数量
C.装坛时不装满的原因是为了促进微生物繁殖
D.红酸汤的制作中发酵时间越长，口味越纯正
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】某林场在桉树幼林里栽培菠萝，通过精心管理，取得了桉树、菠萝两旺，提高了经济效益。已知桉树是深根性树种，菠萝的根系很浅；幼桉树喜光，一般高度在2m左右，菠萝是半阴性植物，多在1m以下。请回答下列问题：
（1）此林场可看作是生命系统结构层次中的____________________________。
（2）区别该林场和其他林场生物群落的重要特征是_________________________。该林场桉树、菠萝的种植方式体现了生物群落具有明显的________________现象，可以显著提高群落利用____________________（答2点）等环境资源的能力。
（3）如图是该林场中部分生物的能量流动简图。若A、B、C、D各代表一种生物，请写出此图所包含的食物链：________________________________________________。据图计算，在初级消费者、次级消费者之间的能量传递效率为__________________。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】图方框内为人体内某组织或器官的结构示意图，a、b、c分别表示不同的体液，据图判断，下列叙述正确的是（ ）
A.b中红细胞内血红蛋白所携带的O2进入组织细胞被利用至少要穿过5层磷脂双分子层
B.b渗入a的量与a渗回b的量相同
C.b是血浆，其渗透压大小主要与b中无机盐和蛋白质的含量有关
D.若图示方框为胰岛组织，则饥饿时b中Ⅱ端比Ⅰ端葡萄糖含量高
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