Question

【题目】登革热病毒可以感染人类并导致严重疾病，为获得适用于临床检测的病毒抗原，研究者从登革热病毒中获取其外膜抗原基因，让它在大肠杆菌中进行表达，具体过程如图． 请回答下列问题：

（1）登革热病毒需培养在动物细胞中，原因是 ． 细胞培养液中常常需要添加 ， 以防培养过程中受污染．
（2）①过程包括和扩增，分别需要的酶是和 ．
（3）②过程需要的工具酶是 ．
（4）获得的病毒蛋白可用于检测患者血清中的（抗原/抗体），以确诊疾病．

Answer 1

【答案】
（1）病毒无法独立生活，必须寄生在活细胞中；抗生素
（2）逆转录（反转录）；PCR（目的基因）；逆转录酶；Taq酶
（3）限制酶和DNA连接酶
（4）抗体
【解析】解：（1）病毒无法独立生活，必须寄生在活细胞中，因此登革热病毒需培养在动物细胞．动物细胞培养时，为了防止杂菌污染，需要在培养液中加入抗生素．（2）登革热病毒的遗传物质是RNA，因此①过程包括逆转录（反转录）和PCR（目的基因）扩增，逆转录需要逆转录酶的催化，PCR技术在较高温度下进行，需要耐高温DNA聚合酶（Taq酶）．（3）②表示基因表达载体的构建过程，该过程首先需要用限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．（4）根据抗原﹣抗体特异性结合的原理，获得的病毒蛋白可作为抗原，用于检测患者血清中的抗体，以确诊疾病． 所以答案是：（1）病毒无法独立生活，必须寄生在活细胞中；抗生素；（2）逆转录（反转录）；PCR（目的基因）；逆转录酶；Taq酶；（3）限制酶和DNA连接酶；（4）抗体
【考点精析】本题主要考查了基因工程的原理及技术的相关知识点，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术才能正确解答此题．