Question

【题目】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图：
请回答：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的 ．
（2）ES细胞除来源于早期胚胎外，还可来源于 ， 它在形态上的特性；在功能上的特性是 ．
（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体．可以根据Rag2基因的设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段．用HindⅢ和PstⅠ限制酶限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段．为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有的酶切位点．
（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞中的 ， 用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验．

Answer 1

【答案】
（1）细胞核
（2）原始性腺；体积小、细胞核大、核仁明显；具有发育的全能性,即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞
（3）核苷酸序列； HindⅢ和PstⅠ限制酶
（4）蛋白质
【解析】解：（1）核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中，所以实验前要去除卵母细胞的细胞核．（2）ES细胞来源于早期胚胎和原始性腺，它在形态上的特性是：体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上的特性是具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞．（3）步骤③中，根据Rag2基因的核苷酸序列设计引物并扩增Rag2基因片段．基因工程中构建基因表达载体时，应用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，若用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段，则为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有HindⅢ和PstⅠ酶的酶切位点．（4）为检测Rag2基因的表达情况，可采用抗原﹣抗体杂交法，即提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质（抗原），用抗Rag2 蛋白的抗体进行杂交实验．

所以答案是：（1）细胞核（2）原始性腺 体积小、细胞核大、核仁明显 具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞（3）核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ限制酶（4）蛋白质

【考点精析】本题主要考查了基因工程的原理及技术和动物细胞核移植技术的相关知识点，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术；动物体细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新胚胎最终发育为动物个体才能正确解答此题．