Question

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用__________________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含______的培养基上进行。

(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是______(填字母代号)。

A．启动子　　B．tet^R　　C．复制原点　　D．amp^R

(3)过程①可采用的操作方法是______(填字母代号)。

A．农杆菌转化　　　　　B．大肠杆菌转化

C．显微注射 D．细胞融合

(4)过程②采用的生物技术是________________。

(5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的______性。

(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用______(填字母代号)技术。

A．核酸分子杂交 B．基因序列分析

C．抗原—抗体杂交 D．PCR

 

Answer 1

(1)Hind Ⅲ和BamHⅠ　氨苄青霉素　(2)A　(3)C　(4)胚胎移植技术　(5)全能　(6)C

 

(1)由图示可知：需用Hind Ⅲ和BamHⅠ限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因，因酶切后tet^R四环素抗性基因结构被破坏而amp^R结构完好，故用含氨苄青霉素的选择培养基可筛选含有重组载体的大肠杆菌。(2)启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶识别和结合的位点，可调控基因的特异性表达。(3)过程①表示把重组载体导入受体细胞的过程，当受体细胞为动物细胞时，常采用显微注射法。(4)过程②表示把早期胚胎移植到代孕母牛子宫的过程，属于胚胎移植技术。(5)经过程②得到新个体是细胞全能性的体现。(6)人乳铁蛋白基因是否成功表达，关键看是否有其表达产物即人乳铁蛋白，可用抗原—抗体杂交法检测该蛋白是否存在。