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    3．如图是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题：
    资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOXI基因受到诱导而表达[5′AOXI和3′AOXI（TT）分别是基因AOXI的启动子和终止子]．
    资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达．
    （1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上SnaBI、AvrⅡ限制酶识别序列，这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化．
    （2）酶切获取HBsAg基因后，需用DNA连接酶将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取大量重组质粒．
    （3）步骤3中应选用限制酶BglⅡ来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞．
    （4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用DNA分子杂交方法进行检测．
    （5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入甲醇以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达．
    （6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行加工并分泌到细胞外，便于提取．

    分析 分析题图：图中质粒含有SnaB、AvrⅡ、BglⅡ和SacI限制酶切割位点，其中SacI位于启动子上，BglⅡ位于终止子上．要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，只能用限制酶SnaB和AvrⅡ切割质粒，要获取含有5′AOX1--3′AOX1段基因，应选用限制酶BglⅡ来切割．5′AOX1--3′AOX1段基因含有卡那霉素抗性基因，在培养基中加入卡那霉素以便筛选导入重组质粒的目的菌．

    解答 解：（1）图中质粒含有SnaB、AvrⅡ、BglⅡ和SacI限制酶切割位点，其中SacI位于启动子上，BglⅡ位于终止子上．如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，只能用限制酶SnaB和AvrⅡ切割质粒，所以应在HBsAg基因两侧的A和B位置接上SnaB、AvrⅡ限制酶识别序列．这两种酶切割产生的黏性末端不同，这样可以避免质粒和目的基因自身环化，还可以防止目的基因和质粒反向连接．
    （2）获取目的基因后，需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取大量重组质粒．
    （3）步骤3是要获取含有5′AOX1--3′AOX1段基因，应选用限制酶BglⅡ来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞．
    （4）转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用DNA分子杂交方法进行检测．
    （5）巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，同时甲醇能诱导AOX1基因表达．所以转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入甲醇以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达．
    （6）细菌是原核生物，只含核糖体一种细胞器，而酵母菌是真核生物，除含有核糖体外，还含有内质网、高尔基体等细胞器．所以与细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行加工（修饰）并分泌到细胞外，便于提取．
    故答案为：
    （1）SnaBI 　AvrⅡ
    （2）DNA连接酶　大量重组质粒　
    （3）BglⅡ
    （4）DNA分子杂交
    （5）甲醇　
    （6）加工

    点评 本题结合工程菌形成过程，考查基因工程的相关知识，意在考查考生分析题图获取有效信息的能力；理解所学知识要点，把握知识间联系的能力；能运用所学知识解决生物学问题的能力和应用能力．

    练习册系列答案
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    15．人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成．通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是（　　）
    A．枯草芽孢杆菌B．昆虫细胞C．T4噬菌体D．质粒

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    16．下列关于细胞膜流动性的叙述中，正确的是（　　）
    A．因为磷脂分子在细胞膜上能运动，使细胞膜有流动性
    B．因为蛋白质分子镶嵌磷脂分子层不能运动，所以它与细胞膜的流动性无关
    C．细胞膜的流动性是指蛋白质载体的翻转运动，与磷脂分子无关
    D．细胞膜流动性与蛋白质分子和磷脂分子都有关

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    12．如图表示植物细胞亚显微结构模式图．请据图回答：
    （1）图中结构1是细胞膜，其主要成分由脂质和蛋白质组成．
    （2）提供细胞能量的“动力车间”为[11]线粒体，该结构是进行有氧呼吸的主要场所．
    （3）结构5为高尔基体，是对蛋白质进行加工、分类和包装的“车间”．
    （4）细胞内有双层膜的结构又是细胞控制中心的是细胞核．
    （5）如果此图为洋葱根尖细胞，则应该没有[4]叶绿体．
    （6）西瓜果肉细胞中，糖类主要存在于[14]液泡．
    （7）图中13指的是核糖体，它是细胞合成蛋白质的场所．

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    19．部分神经元之间的联系如图所示，若分别在甲、乙两处提供适宜刺激，引起肌肉收缩的情况是（　　）
    A．刺激甲，只有I、Ⅱ收缩B．刺激甲，I-Ⅳ都不收缩
    C．刺激乙，只有Ⅲ、Ⅳ收缩D．刺激乙，I-Ⅳ都收缩

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    7．如图A、B分别是某植物叶肉细胞中的两种膜结构，以及在其上发生的生化反应．
    请据图回答：
    （1）构成膜的基本骨架是磷脂双分子层．
    （2）图A属于光合作用的光反应阶段，图B属于有氧呼吸的第三阶段．
    （3）图B所示的细胞器通过内膜向内折叠形成嵴，以增加膜面积．
    （4）如突然减少CO2的供应，叶绿体中C3的含量将降低．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    14．如图所示是探究酵母菌细胞呼吸方式的实验装置，以下说法中正确的是（　　）
    A．两个装置均需要在黑暗条件下进行
    B．装置乙中应让Ⅱ先放置一会再与Ⅲ连接
    C．装置乙在Ⅲ处可检测到有酒精生成
    D．装置甲中NaOH的作用是吸收I处的CO2

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    11．如图是几种生物的基本结构单位，请据图回答：

    （1）图中拟核中重要的化学成分是DNA，A和B在结构上不同于C、D结构图的显著特点是没有核膜包被的成形的细胞核；A、B、C、D的统一性表现在都具有细胞膜、细胞质以及遗传物质DNA．图中需要与其他分化的细胞合作才能完成其生命活动的细胞是C、D．
    （2）图中能进行光合作用的细胞是B，能完成此生理过程的物质基础是因为其内含有叶绿素，因而它是一类营自养生活的生物．C与D在细胞结构的区别是D细胞没有细胞壁和液泡．
    （3）C和D的遗传物质主要存在于细胞核．

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    12．已知3对等位基因（A和a、B和b、C和c）独立遗传，若有一对夫妇的基因型为AaBBCc×aaBbCc，则其子女中基因型为aaBBCC的比例和女儿中表现型为aaB__c__的比例分别为（　　）
    A．$\frac{1}{8}$  $\frac{3}{8}$B．$\frac{1}{8}$   $\frac{3}{16}$C．$\frac{1}{16}$  $\frac{3}{8}$D．$\frac{1}{16}$   $\frac{3}{16}$

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