如图为绿色荧光小鼠制备流程图.Gfp是绿色荧光蛋白基因.请分析回答:(1)构建表达载体需要的酶是:限制性核酸内切酶.DNA连接酶.表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp.标记基因.启动子.终止子和复制原点等,构建表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在.表达和发挥作用.并可遗传给下代．(2)提取Gfp基因时常用到PCR技术.PCR� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

8．如图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：

（1）构建表达载体需要的酶是：限制性核酸内切酶、DNA连接酶，表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、标记基因、启动子、终止子和复制原点等；构建表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，表达和发挥作用，并可遗传给下代．
（2）提取Gfp基因时常用到PCR技术，PCR扩增目的基因时，首先要根据目的基因的核苷酸序列合成引物；需要加入两种引物，原因是DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增．

分析分析题图：图示为绿色荧光小鼠制备流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示将表达载体导入胚胎干细胞；③表示胚胎干细胞的体外培养过程；④表示冲卵，即冲出胚胎的过程；⑤表示将胚胎干细胞团注入囊胚；⑥表示胚胎移植过程．

解答解：（1）构建表达载体时，先需要用限制酶切割含有目的基因的DNA分子和运载体，还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒；表达载体包含目的基因（绿色荧光蛋白基因Gfp）、标记基因、启动子、终止子和复制原点等．构建表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，表达和发挥作用，并可遗传给下代．
（2）提取Gfp基因时常用到PCR技术，PCR扩增目的基因时，首先要根据目的基因的核苷酸序列合成引物；DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链，因此需要加入两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶标记基因启动子（这两空可以互换顺序）稳定存在，表达和发挥作用
（2）目的基因的核苷酸序列 DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链

点评本题结合绿色荧光小鼠制备流程图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息答题．

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（2）图一中，以12：30以后，转基因棉的净光合速率小于（大于/小于）非转基因棉净光合速率．
（3）结合图一和图二分析，7：00〜8：30非转基因棉胞间CO₂浓度迅速下降的主要原因是净光合速率迅速增强，消耗胞间CO₂的量亦增加（或使胞间的CO₂浓度迅速下降）．
（4）结合图一和图二，图中阴影所示区段，影响转基因棉乙净光合速率的主要因素有光照强度（或“温度”或“光照强度和温度”）．
（5）有人依据转BT基因棉花的净光合速率大于非转基因棉花，推测BT基因与棉花净光合速率的关系可能是：①④（多选）．
①BT基因抑制了转基因棉的细胞呼吸
②BT基因促进了转基因的细胞呼吸
③BT基因抑制了转基因棉的光合作用
④BT基因促进了转基因棉的光合作用．

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