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    2．细胞的种类不同，特异性表达的蛋白质也不同，如效应T细胞可以产生干扰素，乳腺细胞可以分泌乳腺蛋白，膀胱壁细胞可分泌尿血小板溶素膜蛋白．其中效应T细胞产生的干扰素（IFN）具有抑制细胞分裂、调节免疫、抗病毒、抗肿瘤等多种作用．请回答下列问题．
    （1）通过分析干扰素的氨基酸序列，可人工合成编码干扰素的脱氧核苷酸序列，该序列不是（填“是”或“不是”）唯一的．利用PCR的方法对人工合成的干扰素基因扩增时，用加热方法使DNA变性．
    （2）若将干扰素基因导入癌细胞，在无菌、无毒的环境，一定的营养，适宜的温度和pH，气体环境等条件下，可从体外培养的培养液中源源不断地提取得到干扰素．
    （3）目的基因在血液中表达的转基因动物叫做血液反应器．由于某些物质进入血液会影响动物的健康，因此血液生物反应器比较适合生产抗体、干扰素（选填“胰岛素”“抗体”或“干扰素”中的一种或多种）．
    （4）乳腺生物反应器的原理是外源基因与乳腺蛋白基因的启动子构建成基因表达载体，使干扰素基因在乳腺中表达，通过回收乳汁获得干扰素．
    （5）膀胱反应器可将干扰素基因插入尿血小板溶素膜蛋白基因中，使干扰素分泌到尿液中．与乳腺反应器相比，膀胱反应器的优势表现在周期短、不受性别和年龄的限制．

    分析 基因工程技术的基本步骤：
    （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）目的基因的获取可以采用人工合成的方法，即通过分析干扰素的氨基酸序列，可人工合成编码干扰素的脱氧核苷酸序列，由于一种氨基酸可以由多种密码子决定，因此通过该方法获得的序列不是唯一的．利用PCR的方法对人工合成的干扰素基因扩增时，用加热方法使DNA变性．
    （2）若将干扰素基因导入癌细胞，需要采用动物细胞培养技术培养癌细胞，即在无菌、无毒的环境，一定的营养，适宜的温度和pH，气体环境等条件下，可从体外培养的培养液中源源不断地提取得到干扰素．
    （3）胰岛素在动物的血液中会降低动物的血糖，对动物有害；而抗体和干扰素属于免疫活性物质，对动物健康有利，因此血液生物反应器比较适合生产抗体、干扰素．
    （4）乳腺生物反应器的原理是外源基因与乳腺蛋白基因的启动子构建成基因表达载体，使干扰素基因在乳腺中表达，通过回收乳汁获得干扰素．
    （5）膀胱反应器可将干扰素基因插入尿血小板溶素膜蛋白基因中，使干扰素分泌到尿液中．与乳腺反应器相比，膀胱反应器的优势表现在周期短、不受性别和年龄的限制．
    故答案为：
    （1）脱氧核苷酸     不是    加热
    （2）无菌、无毒
    （3）抗体、干扰素
    （4）乳腺蛋白基因
    （5）尿血小板溶素膜蛋白       周期短、不受性别和年龄的限制

    点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够掌握基因工程的原理和方法步骤，识记动物细胞培养的条件，掌握动物基因工程中血液反应器、乳腺生物反应器、膀胱反应器的应用和过程．

    练习册系列答案
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    限制酶识别序列和切割位点
    EcoRⅠ↓
    GAATTC
    BamHⅠ↓
    GGATCC
    （1）该工程中适宜用来切割质粒的限制酶是BamHⅠ，原因是用EcoRⅠ切割会将质粒上的两个抗性基因都破坏．
    （2）获取血清白蛋白基因可以利用反转录法构建的cDNA文库中获取，若利用PCR技术扩增血清蛋白基因，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列，还需要在引物的一端加上GGATCC序列，以便于后续的剪切和连接．
    （3）将目的基因和质粒进行连接后，需先用Ca2+处理农杆菌以便将基因表达载体导入马铃薯细胞，筛选含有目的基因的细胞需在培养基中添加氨苄青霉素．
    （4）从含有血清白蛋白基因的马铃薯细胞中提取血清白蛋白，需通过脱分化过程培养到愈伤组织，从其中提取．

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