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    【题目】利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是（ ）

    A.过程①需使用逆转录酶

    B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因

    C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备

    D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞

    【答案】AD

    【解析】

    过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程，即逆转录过程；过程②表示利用PCR扩增目的基因；过程③表示将重组质粒导入大肠杆菌；过程④培养并筛选转基因大肠杆菌，级工程菌。

    A、过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程，即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，故A正确；
    B、过程②表示利用PCR扩增目的基因，在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，故B错；
    C、利用氯化钙处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞，故C错；
    D、检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中，可以采用DNA分子杂交技术，故D正确。
    故选AD。

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】人和高等动物的小肠肠壁内分布着由大量神经元构成的黏膜下神经丛，该神经丛可以接受来自脑干的神经支配，同时也参与腺体分泌等局部反射活动，如图所示。

    （1）当来自脑干的兴奋传导到神经丛时，通过神经末梢释放___，引起神经元③产生兴奋，当兴奋传到m点时，m点膜外电位的变化过程是___。神经元③兴奋不能引起神经元④出现电位变化，即兴奋在神经元之间的传递是单向的，原因是___。

    （2）小肠肠腔的酸度增加，可通过局部反射活动引起腺体的分泌。若图中腺体对小肠肠腔的酸度增加无法做出反应，但来自脑干的兴奋仍可使其分泌，现已确定上述现象出现的原因是某突触异常，则由图可知，出现异常的突触在神经元___（填图中序号）之间。已知用电极刺激神经元可使其产生兴奋，请设计实验证明该突触异常，简要写出实验思路并预期实验现象：___。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

    （1）原癌基因的作用是____________________。

    （2）H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建胞外区基因，转入原核细胞表达并提纯。选择胞外区的原因是_________________。为了扩增出大量胞外区需要用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤，退火的目的是________________________。设计引物是PCR技术的关键步骤之一，某同学设计的两组引物如下表所示。_________（填“引物对A”或“引物对B”）设计不合理，并说出不合理的理由：______________________________________。

    引物对A

    P1 AAGCCGGGCGCGCCCGGAA

    P2 TTCGGCCCGCGTTATGCGCG

    引物对B

    S1 GTCCGCTAGTGGCTGTG

    S2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG

    （3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内。这样做的目的是_____________________________。制备抗H蛋白单克隆抗体时，需要用到细胞融合技术，该技术的主要优点是_____________________________________。

    （4）治疗乳腺癌时，方法之一是单独使用抗H蛋白单克隆抗体，试写出治疗乳腺癌的另一种疗效高、毒副作用小的、不损伤正常细胞的方法：________________。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】紫罗兰（2n=14）花色丰富、抗虫性强、种子油富含 X- 3-亚麻酸。为了让油菜（2n=38）具有紫罗兰的诸多优良性状，科研工作者进行了如图 1 所示实验，请分析回答：

    （1）为了培养紫罗兰—油菜，科研工作者选取二者的下胚轴细胞，并用_____酶和____酶处理去除细胞壁，从而获得原生质体。再用 PEG 诱导二者融合，所依据的生物学原理是细胞膜的_____。

    （2）科研工作者分别用 4 种浓度的 PEG 对两种原生质体进行了融合试验，结果如图2所示：

    注：1．由两个原生质体进行的融合称为二源融合；大于两个原生质体进行的融合称为多源融合；

    2．紫罗兰—油菜是由一个紫罗兰原生质体和一个油菜原生质体融合后培养产生的。

    ①该实验的自变量是_________，根据实验结果，为提高紫罗兰—油菜的成功率，应选用的最佳 PEG 浓度为_____％。

    ②图中二源融合原生质体最多为_____种，想确定二源融合原生质体是否为紫罗兰和油菜融合而成，需要借助_____观察染色体的形态和数目。

    （3）筛选出所需的杂种细胞后，还要采用____________技术才能获得杂种植物，该过程需要在培养基中加入一定浓度的_________（填写相关植物激素的名称），使其脱分化形成愈伤组织，继而再分化，并生长发育成完整植株。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】下图表示从细菌中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是（ ）

    A.甲方法可建立基因组文库

    B.乙方法可建立cDNA 文库

    C.甲方法要以核苷酸为原料

    D.乙方法需要逆转录酶参与

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是

    A.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞

    B.②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成

    C.③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性

    D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】回答有关乳腺生物反应器问题。

    Ⅰ．人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

    （1）htPA基因与载体用同种__________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_______________________技术。

    （2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要经过__________，才具备受精能力。

    （3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行____________。移植后对受体母羊还需进行____________的检查。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的____________。

    （4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到____________，说明目的基因成功表达。

    Ⅱ．科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

    （1）由过程①获得的A为________________________。

    （2）在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是___________________。受体应选用____________期卵母细胞。

    （3）进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生____________，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。

    （4）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为______________________________。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】回答下列“蛋白质提取与分离实验”的有关问题：

    （1）为了提取和分离血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是___________。

    （2）血红蛋白粗分离阶段，采用图1的透析装置，透析的目的是___________，透析液选用的是___________，一段时间后，若向烧杯中加入双缩脲试剂，透析袋内溶液是否出现紫色并说明判断的依据：___________。

    （3）图2是利用电泳法分离蛋白质的结果，电泳利用了待分离样品中各种分子的___________等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。

    （4）图3是用于分离蛋白质的凝胶色谱柱，装填凝胶色谱柱时，若发现有气泡，则需___________。a、b均为蛋白质分子，其中先从凝胶色谱柱中洗脱出来的是a，是因为a蛋白质分子___________。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】限制酶a、限制酶b能将某线性DNA分子片段切割，其识别序列和切割位点如下图所示。下列叙述错误的是（ ）

    A.限制酶a与限制酶b发挥作用的化学键完全相同

    B.限制酶a与限制酶b切出的黏性末端能相互连接

    C.所有限制性核酸内切酶识别的序列都由6个核苷酸组成

    D.限制酶将该DNA分子切成2个片段需消耗2个水分子

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