Question

萌发的禾谷类种子中淀粉酶的含量显著增高，主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6、0℃下可迅速失活，而β-淀粉酶耐酸、不耐热，在70℃条件下15min后失活．某实验小组进行了“测定α-淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”的实验．
实验材料：萌发3天的小麦种子（芽长约1cm）．试剂、仪器：略．
实验步骤：
步骤一：制备酶溶液．获取酶溶液（含上述两种酶）离心分离研磨：5g萌发的小麦种子+少量石英砂+10ml蒸馏水．
步骤二：将酶溶液置于

 

，取出后冷却．
步骤三：取6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号，按下表要求加入试剂，再观察各试管内的颜色变化（注：+表示碘液变蓝色，-表示碘液不变色）．

试管编号	1	2	3	4	5	6
5%的可溶性淀粉溶液（mL）	8	8	8	8	8	8
恒温水浴5min（℃）	0	20	40	60	80	100
α-淀粉酶保持活性而β-淀粉酶失去活性的溶液（mL）	1	1	1	1	1	1
恒温水浴5min（℃）	0	20	40	60	80	100
溶液混合，振荡后恒温水浴5min（℃）	0	20	40	60	80	100
加入碘液，振荡后观察颜色变化	+++	++	+	-	++	+++

回答下列问题：
（1）选用萌发的小麦种子提取液的主要原因是小麦种子萌发时

 

．
（2）请补充步骤二的具体操作．
（3）从该实验能否推断出α-淀粉酶的最适温度是60℃？

 

．理由是

 

．
（4）该实验能否选用斐林试剂检测实验结果？

 

，原因是

 

．
（5）如果想了解淀粉酶是否属于蛋白质，可用

 

试剂，加入该试剂后，溶液呈

 

．

Answer 1

考点：探究影响酶活性的因素,检测蛋白质的实验

专题：

分析：小麦种子中含淀粉丰富，萌发时形成大量淀粉酶；该实验测定α-淀粉酶催化淀粉水解的最适温度，因此要使取得的酶液中的β-淀粉酶失去活性，而根据α-淀粉酶较耐热，β-淀粉酶不耐热的特性，在70℃条件下将获得的酶液处理15 min，可使酶液中的β-淀粉酶失活；根据α-淀粉酶不耐酸，在pH为3.6、0℃下可迅速失活，而β-淀粉酶耐酸的特性，只需将步骤一中制取的酶液置于pH为3.6，温度为0℃的环境中短暂时间，使α-淀粉酶失去活性，即可得到β-淀粉酶保持活性而α-淀粉酶失活的酶溶液．

解答： 解：（1）小麦种子中含淀粉丰富，萌发时形成大量淀粉酶．
（2）该实验测定α-淀粉酶催化淀粉水解的最适温度，因此要使取得的酶液中的β-淀粉酶失去活性，而根据α-淀粉酶较耐热，β-淀粉酶不耐热的特性，在70℃条件下将获得的酶液处理15min，可使酶液中的β-淀粉酶失活．
（3）因为试管4的温度为60℃，加入碘液，振荡后观察颜色变化，发现试管4中碘液不变色，说明60℃时该酶的活性比其他实验温度下高，而不能说明比40℃至80℃间的其他温度下活性高，因此不能肯定α-淀粉酶的最适合温度一定是60℃．
（4）由于利用斐林试剂检测时需要水浴加热，会改变了该实验中的自变量（温度），影响实验最终结果，所以不能选用斐林试剂检测实验结果．
（5）如果想了解淀粉酶是否属于蛋白质，可用双缩脲试剂，加入该试剂后，溶液呈紫色．
故答案为：
（1）淀粉酶的含量较多
（2）70℃条件下15min
（3）不能    实验设定的温度梯度较大，只能说明在60℃时酶的活性较其他实验温度时高，但不能说明比未实验的那些温度高
（4）不能    斐林试剂检测时需要水浴加热，会改变实验的自变量（温度）
（5）双缩脲      紫色

点评：本题考查测定α-淀粉酶催化淀粉水解的最适温度的相关知识，意在考查学生的分析图表的能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析的能力．