Question

18．如图为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤．请回答下列问题：

（1）①是制备培养基时倒平板中的主要操作，该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是通过（灼烧）灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基．
（2）图中所示接种方法是平板划线法．完成步骤④的操作，接种共需要6次的灼烧处理，其中最后一次灼烧的目的是及时杀死接种环上残留菌种，避免细菌污染环境和感染操作者．
（3）纯化的醋酸菌菌种将频繁用于果醋生产，则可以采用临时保藏的方法保存菌种，但这种方法保存的时间不长，原因是菌种容易被污染或产生变异．
（4）将醋酸菌加入果酒中，乙醇为醋酸菌的生命活动可提供能量和碳源，将温度控制在30～35℃，可以获得较多果醋．

Answer 1

分析 1、平板划线的操作的基本步骤是：
（一）右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞．
（二）左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面．
（三）烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连．
（四）将平板倒置，放入培养箱中培养．
2、菌种保存

	临时保存法	甘油管藏法
适用对象	频繁使用的菌种	长期保存的菌种
培养及类型	固体斜面培养基	液体培养基
温度	4℃	-20℃

解答 解：（1）①是制备培养基时倒平板中的主要操作，该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是通过灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基．
（2）根据图④可知，该纯化醋酸菌的接种方法是平板划线法（或稀释涂布平板法）．平板划线时，每次划线前都要进行灼烧，最后一次划线结束也要进行灼烧，因此共需要6次的灼烧处理．其中最后一次灼烧的目的是及时杀死接种环上残留菌种，避免细菌污染环境和感染操作者．
（3）纯化的醋酸菌菌种将频繁用于果醋生产，则可以采用临时保藏的方法保存菌种，但这种方法保存的时间不长，原因是菌种容易被污染或产生变异．
（4）将醋酸菌加入果酒中，乙醇可为醋酸菌的生命活动提供能量和碳源；果醋发酵的适宜温度是30～35℃．
故答案为：
（1）倒平板      （灼烧）灭菌
（2）平板划线法       6      及时杀死接种环上残留菌种
（3）临时保藏        菌种容易被污染
（4）能量和碳源       30～35

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的制备过程；识记接种微生物常用的两种方法；识记菌种保藏的方法，能结合所学的知识准确答题．