2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家．绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光.这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况.帮助推断蛋白质的功能．GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠.下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程.请分析回答:(1)图示培育绿色荧� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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19．2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家．绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能．GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠，下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程，请分析回答：

（1）图示培育绿色荧光小鼠的两个核心是①基因表达载体的构建、④胚胎移植，过程①将目的基因插入质粒后，需要通过DNA连接酶使质粒的切口与目的基因切口黏合．
（2）图中过程②常用的方法是显微注射法；过程③利用的生物技术是早期胚胎培养；进行过程④前，利用胚胎分割技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠．
（3）受精卵培养成早期胚胎后，移植到经过同期发情处理的受体母羊子宫内，因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加动物血清．
（4）由于荧光蛋白在自然界中不存在，所以科学家通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程最终是通过设计荧光蛋白质基因的脱氧核苷酸序列序列来完成的．

分析 1、根据题意和图示分析可知：图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程，其中①表示基因表达载体的构建过程，②表示将目的基因导入受体细胞，③表示早期胚胎培养，④表示胚胎移植，⑤表示个体发育．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等
3、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术

解答解：（1）基因工程技术的基本步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中基因表达载体的构建是核心步骤，胚胎工程中，胚胎移植是核心步骤．过程①将目的基因插入质粒后，需要通过DNA连接酶使质粒的切口与目的基因切口黏合．
（2）过程②将基因表达载体导入小鼠受精卵时，采用最多也最有效的方法是显微注射技术；过程③利用的生物技术是早期胚胎培养；在进行胚胎移植前，利用胚胎分割技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠．
（3）胚胎移植时，要对受体进行同期发情处理，这样可以为胚胎移植入受体子宫提供相同的生理环境；早期胚胎的培养中，除基本营养成分外，还需要添加动物血清．
（4）科学家通过蛋白质工程制造出自然不存在的蛋白质，蛋白质工程的操作过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）→基因表达合成相应的蛋白质．
故答案为：
（1）①基因表达载体的构建、④胚胎移植         DNA连接酶
（2）显微注射法   早期胚胎培养  胚胎分割
（3）同期发情     动物血清
（4）蛋白质   荧光蛋白质基因的脱氧核苷酸序列

点评本题结合我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，考查基因工程的原理及技术、核移植技术及胚胎工程技术，重点考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作过程，能准确判断图中各步骤的名称及采用的生物技术．

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