Question

8．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（　　）

• A． 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
• B． 取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
• C． 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时
• D． 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

Answer 1

分析 统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数．

解答 解：A、确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的实验组平板进行计数，A错误；
B、取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上，B正确；
C、将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时，C正确；
D、平板培养基的制备步骤为：计算、称量、融化、灭菌、倒平板．因此，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，D正确．
故选：A．

点评 本题考查微生物的分离和培养，重点考查微生物计数的相关知识，要求考生识记培养基的制备过程；识记计数微生物常用的两种方法，尤其是稀释涂布平板法，能结合所学的知识准确答题．