Question

10．黑麦草具有抗除草剂草甘麟的能力，是因为黑麦草拥有编码抗草甘麟酶的基因．科学家利用该基因．通过转基因技术获得了抗除草剂草甘磷的玉米新品种．培育新品种过程中用到了PCR技术（如图所示），请回答下列问题：
（1）通过反转录法得到cDNA文库，从中选取抗草甘磷酶的基因．该方法获得的目的基因缺少基因表达所需的调控序列，即启动子．
（2）体外获得大量编码抗草甘麟酶的基因要利用PCR技术，该技术所依据的原理为DNA双链复制，图中物质A是引物，B酶是Taq（或“耐高温的DNA聚合”）．
（3）将目的基因导入植物细胞有多种方法，最常用的是农杆菌转化法．
（4）若需要对转入抗草甘麟基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米做喷洒草甘膦操作．
（5）若实验结果不理想，为了提高抗草甘麟酶活性，可以通过蛋白质工程设计和改造编码抗草甘麟酶的基因．

Answer 1

分析 解答本题需识记有关PCR技术的相关知识：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
2、原理：DNA复制．
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
4、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开．

解答 解：（1）通过反转录法得到cDNA 文库，从中选取抗草甘磷酶的基因．采用反转录的方法得到的目的基因没有启动子、终止子．
（2）体外获得大量编码抗草甘麟酶的基因要利用PCR技术，PCR技术以解开的双链作为模版，利用的原理是DNA复制，图中物质A是引物，B酶是耐高温的Taq酶．
（3）将目的基因导入植物细胞有多种方法，最常用的是农杆菌转化法．
（4）若需要对转入抗草甘麟基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米做喷洒草甘膦操作，以检验是否抗草甘膦．
（5）若实验结果不理想，为了提高抗草甘麟酶活性，可以通过蛋白质工程设计和改造编码抗草甘麟酶的基因．
故选：．
（1）cDNA      启动子
（2）DNA双链复制      引物      Taq （或“耐高温的DNA聚合”）
（3）农杆菌转化法
（4）喷洒草甘膦
（5）蛋白质

点评 本题考查PCR技术的相关知识，对于此类试题，学生需对相关知识进行归纳总结，构建一定的知识网络，本题意在考查考生的识记能力和理解能力．