Question

20．尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如表所示，实验步骤如图所示．请分析回答．

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000mL．
（1）此培养基不能 （填“能”或“不能”）用于植物组织培养，理由是缺少植物激素．
（2）培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌，这种培养基属于选择培养基．
（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的尿素和葡萄糖，实验需要振荡培养，原因是为目的菌提供氧气．
（4）图中将细菌转到固体培养基上时，可采用稀释涂布平板法或平板划线法在含尿素的培养基上接种，获得单菌落后继续筛选．初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成红色，则可准确说明该菌种能够分解尿素．
（5）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是①，需要消毒的是②③ （填序号）．
①培养细菌用的培养基与培养皿　②玻棒、试管、锥形瓶和吸管　③实验操作者的双手
（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有①②③ （填序号）．
①土样不同　②培养基污染　③操作失误　④没有设置对照
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长．
灭菌的定义，用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌．         
消毒的定义，用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化．

解答 解：（1）该培养基的成分中没有植物激素，因此不能用于植物组织培养．
（2）该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌，因此培养基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的细菌（目的菌）．不能分解尿素的细菌将因缺少氮源无法生长繁殖，因此从功能上看，该培养基属于选择培养基．
（3）目的菌生长繁殖需要的氮源来自尿素，碳源来自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需氧微生物，因此需要震荡培养．
（4）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用稀释涂布平板法或平板划线法的方法接种，获得单菌落后继续筛选．初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成红色，则可准确说明该菌种能够分解尿素．
（5）在实验中，①培养细菌用的培养基与培养皿和②玻棒、试管、锥形瓶和吸管需要灭菌，③实验操作者的双手需要消毒．
（6）该同学与其他同学获得的菌落数差异很大，可能的原因是采用的土样不同，培养基灭菌不彻底，培养基被污染；或者是实验过程中没有进行无菌操作．
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉．
故答案为：
（1）不能  缺少植物激素（或缺少植物需要的各种营养）
（2）筛选目的菌  选择
（3）尿素  葡萄糖  为目的菌提供氧气
（4）稀释涂布平板法  平板划线法   酚红  红
（5）①和②③
（6）①②③
（7）灭菌

点评 本题考查了微生物培养技术的相关知识，考生要明确选择培养基的选择作用；识记培养基为微生物提供的营养成分，识记植物组织培养的培养基的成分；识记常用的接种方法和具体操作过程；特别注意灭菌和消毒的对象和区别．