Question

9．图为利用鸡血细胞进行DNA粗提取和鉴定实验的部分操作示意图，请分析回答：

（1）上述图示中，该实验的正确操作顺序是③一②一⑤一①一④（用序号与箭头表示）．
（2）在提取过程中使用不同浓度的NaCl溶液的目的是利用溶解度不同，把DNA和蛋白质等杂质进行分离．
（3）步骤①的目的是析出并获得DNA，其依据原理是DNA不溶于酒精，提高酒精使用效果的措施是充分预冷后再使用．
（4）DNA可用二苯胺试剂鉴定，沸水浴后的颜色反应为．
（5）实验室还可以利用香蕉等植物样品提取DNA，利用植物组织提取DNA时，须先破碎细胞，破碎细胞时需添加食盐和洗涤剂 进行研磨，添加该物质的目的是瓦解细胞膜，而加入食盐的目的是溶解并提取DNA．

Answer 1

分析 DNA粗提取和鉴定的过程：
（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大．
（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：
动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可．如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜．例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液．
（3）去除滤液中的杂质：
方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；
方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；
方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同．
（4）DNA的析出与鉴定
①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分．
②取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解．然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂．混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝．

解答 解：（1）由以上分析可知，图中表示正确的实验操作顺序是③→②→⑤→①→④．
（2）在提取过程中，利用在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，把DNA和蛋白质等杂质进行分离．
（3）步骤①中所用酒精最佳是经过充分预冷后再使用，该步骤的目的是利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA．
（4）DNA可用二苯胺试剂鉴定，沸水浴后的颜色反应为蓝色．
（5）实验室还可以利用香蕉等植物样品提取DNA，利用植物组织提取DNA时，须先破碎细胞，破碎细朐时需添加食盐和洗涤剂 进行研磨，添加该物质的目的是瓦解细胞膜，而加入食盐的目的是溶解并提取DNA．
故答案为：
（1）③一②一⑤一①一④
（2）利用溶解度不同，把DNA和蛋白质等杂质进行分离
（3）析出并获得DNA DNA不溶于酒精 充分预冷后再使用
（4）二苯胺 蓝色
（5）洗涤剂 瓦解细胞膜   溶解并提取DNA

点评 本题结合图解，考查DNA的粗提取和鉴定，要求考生识记DNA粗提取和鉴定的原理、操作步骤、实验中采用的试剂及试剂的作用等，再结合所学的知识准确答题．