Question

【题目】选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。

（1）实验前取新鲜血液，要在采血器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是__________________。

（2）在对样品进行处理时，主要包括__________、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析技术的原理是______________________。

（3） 利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离，基本原理是__________________(填“相对分子质量大”或“相对分子质量小”)的蛋白质，路程较短，移动速度较快。

Answer 1

【答案】防止血液凝固 红细胞的洗涤 小分子可以自由进出透析袋(半透膜)，而大分子不能通过 相对分子质量大

【解析】

1、电泳的原理：待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、性状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

2、凝胶色谱法分离蛋白质的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

3、血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：

（1）样品处理：①红细胞的洗涤（低速短时间离心），②血红蛋白的释放（需要加入蒸馏水和甲苯），③分离血红蛋白（中速长时间离心）。

（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析．

（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．

（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

（1）加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。

（2）对样品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤．透析的原理是小分子可以自由进出透析袋（半透膜），而大分子不能通过，这样可以除去相对分子质量较小的杂质。

（3） 利用凝胶色谱法进行血红蛋白分离的基本原理是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质。其中相对分子质量大的蛋白质，路程较短，移动速度较快，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢。