基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA(图丙)。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3A Ⅰ(↓GATC)。下列分析合理的是
A.用EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体
B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
D
【解析】
试题分析:用EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体,产生相同的黏性末端,用DNA连接酶连接时可能会发生反向连接,故A错误;用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因切割目的基因会产生两种DNA片段,一种含有目的基因,一种不含目的基因,故B错误;用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体,也能产生相同的黏性末端,可能会发生反向连接,故C错误;只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体,产生不同的黏性末端,防止发生方向连接,这样目的基因插入运载体后,RNA聚合酶的移动方向肯定与图丙相同,故D正确。
考点:本题考查基因工程的操作,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力;能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确的结论。
科目:高中生物 来源:2012-2013学年湖南省益阳市一中高二上学期期末考试理科生物试卷(带解析) 题型:综合题
降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2,据图回答下列问题:
(1)图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA。从功能看,Klenow酶是一种___________酶,合成的双链DNA有________个碱基对。
(2)图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用 处理,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
(3)如果要通过基因工程获得转基因动物,将目的基因导入受体细胞最常用的方法是 。
(4)以下关于蛋白质工程的说法正确的是( )
A.蛋白质工程以基因工程为基础
B.蛋白质工程就是酶工程的延伸
C.蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造
D.蛋白质工程只能生产天然的蛋白质
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科目:高中生物 来源:2015届吉林省高二上期期末考试生物卷(解析版) 题型:综合题
请回答基因工程方面的有关问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链 DNA 片段,它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例为________。
②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段。
(2)设计引物是 PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。
①第 1 组:________________________;
②第 2 组:________________________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定 DNA 聚合酶,下面的表达式不能正确反映 DNA 聚合酶的功能,这是因为____________________________________________________________。
(4)用限制酶 EcoRV 、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的 DNA 片段长度如下图(1 kb 即 1 000 个碱基对),请画出质粒上 EcoRV 、MboⅠ的切割位点。
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科目:高中生物 来源:2012-2013学年浙江省高三高考仿真模拟理科生物试卷 题型:综合题
肺细胞中的let一7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞实现表达增强后,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。
(1)进行过程①时,需用 酶切开载体以插入let一7基因。进行过程②时,需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于 细胞培养。采用PCR技术扩增let一7基因时,在PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等,若在该反应体系中,目的基因扩增了5代,则具有引物I的DNA所占的比例理论上为 。
(2)研究发现,let一7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞中提取 进行分子杂交,以直接检测1et一7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中 (RASmRNA/RAS蛋白质)含量减少引起的。
(3)现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制酶切开后得到仍是长度为1000 bp的DNA分子,说明此DNA分子的形态为 。
(4)某线性DNA分子分别用限制酶Hind Ⅲ和Sma I处理,然后用这两种酶同时处理,得到如下片段(kb为千个碱基对):
限制酶 |
片段及长度 |
Hind Ⅲ |
2.5 kb,5.0 kb |
Sma I |
2.0 kb,5.5 kb |
Hind Ⅲ和Sma I |
2.5 kb,3.0 kb,2.0 kb |
可以推知限制酶Hind Ⅲ和Sma I在此DNA分子中分别有 个识别序列。两酶同时处理后得到的片段,再用限制酶EcoR I处理,结果导致凝胶上3.0 kb的片段消失,产生一种1.5 kb的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I将该线性DNA分子进行切割,则可得到长度分别为 的片段。
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科目:高中生物 来源:2014届湖南省益阳市高二上学期期末考试理科生物试卷(解析版) 题型:综合题
降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2,据图回答下列问题:
(1)图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA。从功能看,Klenow酶是一种___________酶,合成的双链DNA有________个碱基对。
(2)图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用 处理,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
(3)如果要通过基因工程获得转基因动物,将目的基因导入受体细胞最常用的方法是 。
(4)以下关于蛋白质工程的说法正确的是( )
A.蛋白质工程以基因工程为基础
B.蛋白质工程就是酶工程的延伸
C.蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造
D.蛋白质工程只能生产天然的蛋白质
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科目:高中生物 来源:2010年广东省高二上学期期中考试生物试卷 题型:综合题
(每空2分,共11分)请分析回答基因工程的相关问题:
(1)(3分)基因工程的理论基础是 法则,可用公式(图解)表示为
。?
(2)(4分)利用PCR技术(全称: )可以扩增目的基因,即在试管中进行DNA的人工复制获得大量DNA克隆分子。某样品DNA中共含有3000个碱基对,碱基数量满足:(A+T):(G+C)=1 :2,现计划通过PCR得到100个与样品相同的DNA,至少需要向试管中加入 个腺嘌呤脱氧核苷酸。
(3)(4分)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对) |
第一步水解 |
产物 (单位bp) |
第二步水解 |
产物 (单位bp) |
A酶切割 |
1900 |
将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 |
1700 200 |
|
1500 |
800 700 |
|||
1600 |
1100 500 |
由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为 个和 个。
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