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    【题目】回答下列有关动物细胞工程的问题：

    （1）动物细胞培养需要充足的营养、适宜的温度和pH 、______________的环境和一定的气体环境等条件。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________________。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_______。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，可用_____________处理。

    （2）克隆动物的培育体现了 ________________的全能性，使用的供体细胞一般都是传代10代以内的细胞，以保持细胞 __________________。
    （3）单克隆抗体制备过程中，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合常用___________作为诱导因素。对经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行_______________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

    【答案】无菌、无毒 接触抑制 单层 胰蛋白酶 动物体细胞核 正常的二倍体核型 灭活的病毒 克隆化培养和抗体检测

    【解析】

    1、动物细胞培养：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

    2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

    （1）动物细胞培养需要充足的营养、适宜的温度和pH、无毒无菌的环境；当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制；瓶壁上形成的细胞层数是单层；可以用胰蛋白酶将贴壁的细胞从瓶壁上分离下来。

    （2）克隆动物的培养体现了动物体细胞的细胞核具有全能性；由于传代10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，因此使用的供体细胞一般都是传代10代以内的细胞。

    （3）动物细胞融合常用灭活的病毒作为诱导因素；对经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养及抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

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    （4）醋酸杆菌是生产葡萄醋必用的菌种，可以从食醋中分离得到纯化的醋酸杆菌。扩大培养醋酸杆菌时，一般采用平板倒置培养，原因是____________________________________。

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    C. 水在细胞内的存在形式为自由水和结合水

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