Question

5．牛和山羊的瘤胃中有能降解尿素的细菌，某生物兴趣小组为验证该菌对尿素是否有分解作用进行实验，制作培养基中的物质溶解后，用蒸馏水定容至l000mL．回答下列问题：
（1）为了将牛和山羊的瘤胃中降解尿素的细菌进行分离，培养基中的碳源是葡萄糖；培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌．
（2）研究人员对牛和山羊的瘤胃中的微生物取样后，进行了系列梯度的稀释，倍数为10〜10⁷，稀释后将稀释倍数为10⁵、10⁶和10⁷的稀释液分别涂布在三个平板上，并每个稀释倍数各设置一组接种等量菌液的牛肉膏蛋白胨培养基．
①则该同学共需要设置12个培养基，设置牛肉膏蛋白胨培养基做为对照的目的是判断该培养基是否起到选择培养的作用．
②若稀释倍数为10⁵倍的三个平板中的菌落数分别为8、10、11，则不能（填“能”或“不能”）直接用该稀释倍数下的测量数据进行计数，正确的做法是取更低稀释倍数的菌液进行涂布，直到培养基的菌落数在30〜300之间．
（3）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入酚红指示剂后变红色，能说明“目的菌”能分解尿素的原因是细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH增高，使酚红指示剂变红．

Answer 1

分析 1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用．
2、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．稀释涂布平板法进行计数时，应选择30-300的菌落数进行计数．
3、如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择以尿素为唯一氮源的培养基；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，PH增高，使指示剂变红色．

解答 解：（1）为了将牛和山羊的瘤胃中降解尿素的细菌进行分离，由于该细菌属于异养型生物，培养基中的碳源是葡萄糖，氮源是尿素，培养基中加入尿素可以筛选目的菌．
（2）①根据题意可知，“将稀释倍数为10⁵、10⁶和10⁷的稀释液分别涂布在三个平板上”，即3×3=9个培养基，又由于“每个稀释倍数各设置一组接种等量菌液的牛肉膏蛋白胨培养基”，即再加3个培养基，则该同学共需要设置12个培养基，设置牛肉膏蛋白胨培养基做为对照的目的是判断该培养基是否起到选择培养的作用．
②稀释涂布平板法进行计数时，应选择30-300的菌落数进行计数．若稀释倍数为10⁵倍的三个平板中的菌落数分别为8、10、11，不能直接用该稀释倍数下的测量数据进行计数，应取更低稀释倍数的菌液进行涂布，直到培养基的菌落数在30〜300之间．
（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，PH增高，使指示剂变红色．
故答案为：
（1）葡萄糖      筛选目的菌
（2）①12     判断该培养基是否起到选择培养的作用
②不能   取更低稀释倍数的菌液进行涂布，直到培养基的菌落数在30〜300之间
（3）酚红   细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH增高，使酚红指示剂变红

点评 本题考查了微生物分离与培养的有关知识知识，要求考生能够掌握微生物常见的接种的方法，掌握对照实验的原则，识记尿素分解菌鉴定的方法以及颜色反应等．