Question

根据学过的知识回答下列问题：

(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生__________，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可用植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间______________表示。

(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图：

发酵液―→―→含酶的发酵液―→―→―→―→纯酶

　　　　　　　　　　　↓　　 ↓

菌体去除　透析液(Ⅰ)去除

Ⅰ中的主要成分为____________；Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

(3)为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：________________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是________。

(4)除植酸酶外，微生物还应用在________________________的生产中。

 

Answer 1

(1)透明圈　植酸钠的消耗量(肌醇和磷酸的生成量)　(2)小分子杂质

凝胶色谱法，根据蛋白质之间分子大小、吸附性质等差异进行纯化。

电泳法，根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化。

(3)变性，复性，延伸　加热

(4)蛋白酶，脂肪酶，纤维素酶

本题考查对微生物的分离和培养，蛋白质的纯化，酶活性鉴定等知识，结合实际应用。