Question

16．我国科学工作者利用基因和胚胎工程生产人红细胞生成素（htPA），据图回答：

（1）在短时间内获得较多的htPA基因，通常采用PCR技术．构建重组表达载体的构建用到的工具酶有限制酶（或限制性核酸内切酶）和DNA连接酶，重组表达载体中启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（2）检测htPA基因是否已插入受体细胞的染色体DNA，可采用DNA分子杂交技术．
（3）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵； 同时对受体母羊做同期发情处理．
（4）为了获得多个相同的转基因母羊，常采用胚胎分割方法，该方法操作的最佳时期是胚胎发育的桑葚胚或囊胚期．

Answer 1

分析 1、DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
2、目的基因分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
3、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查．

解答 解：（1）PCR技术可以在短时间内大量扩增目的基因；构建基因表达载体时，首先需要用同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）切割外源DNA分子和运载体，以形成相同的黏性末端，然后再通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体；重组表达载体中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（2）检测目的基因是否导入受体细胞采用DNA分子杂交技术．
（3）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵．同时对受体母羊做同期发情处理，保证供受体具有相同的生理环境．
（4）来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了获得更多的转htPA基因母羊，移植前首先对含有htPA基因的胚胎进行胚胎分割和培养，然后再通过胚胎移植技术可获得较多后代．
故答案为：
（1）PCR     限制酶（或限制性核酸内切酶）    DNA连接酶   启动子
（2）DNA分子杂交
（3）超数排卵      同期发情
（4）胚胎分割

点评 本题考查了基因工程和胚胎工程的相关知识，要求考生能够识记基因工程的操作步骤，明确该基因工程中需要选择母羊进行胚胎移植；识记胚胎工程的相关技术及应用，能结合所学的知识准确答题，属于考纲中识记、理解层次的考查．