Question

下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题：

(1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-↓GATC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，那么在①过程中，应用限制酶________切割质粒，用限制酶________切割抗虫基因。请画出质粒被限制性内切酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端：______________。①过程所需工具酶还有__________，该酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？___________。
(2)通过①过程中得到的重组质粒就是基因表达载体，它除了图中所体现的组成外，还必须有的组成是______________等。构建基因表达载体是基因工程的核心，其目的是：使目的基因在受体细胞中___________、_____________。
(3)将通过②程得到的农杆菌涂布在含有________的培养基上，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入。
(4)农杆菌转化法转移目的基因进入受体细胞后，目的基因的最终位置是受体细胞染色体DNA上，是否得到符合要求的受体细胞，检测所采用的方法是：_____________。经筛选分析，该植株细胞中的一条染色体上含有一个携带抗虫基因的DNA片段。理论上，该转基因植株与普通普通棉杂交所获F1中，仍具有抗虫特性的植株占总数的________。科学家们预言，即使是纯种”，独立种植若干代以后植株的抗虫能力也将下降。请简要分析可能原因：_______________、_______________。

Answer 1

(1)Ⅱ Ⅰ(Ⅰ和Ⅱ)              →     DNA连接酶     否
(2)启动子、终止子      在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代      能够表达和发挥作用
(3)四环素
(4)DNA分子杂交技术        1/2      抗虫棉发生基因突变       棉铃虫等害虫的抗性增强