Question

【题目】[生物——选修1:生物技术实践]

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充：

（1）采样与培养:将采集的土样混勻后称取1 g，置于经过_____________法灭菌处理的液体培养基中，28 ℃振荡培养。

（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行_________处理。之后，将菌液涂布接种于以___________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈______状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验的可信度，本步骤需设计_____________作为空白对照。

（3）筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是_____________，则说明此种菌能够_____________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用____________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

Answer 1

【答案】 高压蒸汽灭菌 系列稀释（或“梯度稀释”） 淀粉 倒置 未接种的空白培养基（或“接种等量无菌水的培养基”） 出现透明圈 分泌淀粉酶，使淀粉发生水解 （平板）划线

【解析】试题分析：（1）培养基一般都用高压蒸汽灭菌法灭菌，因为后面要进行涂布，所以应该用液体培养基来培养。

（2）减小培养液菌体浓度一般用梯度稀释的方法．由于题目要求选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，所以培养基就应只以淀粉为唯一碳源．倒置可以减少培养基受污染，为排除其他因素影响，需要设置未接种的空白的培养基作对照组。

（3）淀粉被水解，培养基会出现透明圈的现象，明此种菌能够分泌淀粉酶使淀粉发生水解．用平板划线法来培养，可进一步纯化菌种。