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    20．自养需氧型的硝化细菌能够降低水体中的铵盐，对水体有一定的净化作用．请回答：
    （1）培养硝化细菌时，配制的培养基应采用高压蒸汽法灭菌．将含固体培养基的培养皿倒置的目的是防止冷凝形成水滴污染培养基．培养基中加入铵盐为硝化细菌的生长提供氮源，培养基中没有加入有机碳，从功能上看这种培养基属于选择培养基．
    （2）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水．若实验组每个平板中的菌落数都超过300，应对样本菌液进行适当的稀释处理．
    （3）某同学设计实验探究弱酸、中性或弱碱性下消化细菌对铵盐转化能力的大小，过程如下：取含铵盐的液体培养基均分成三等分，其pH值可依次调节为5、7、9（或6、7、8），培养相同时间后，可通过测定培养基中的铵盐的剩余量来判断硝化细菌分解能力的大小．

    分析 硝化细菌属于化能自养型细菌．筛选目的微生物需要使用选择培养基，用平板培养筛选．稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数．据此分析作答．

    解答 解：（1）培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌．微生物培养中将含有固体培养基的培养皿倒置的目的是防止冷凝形成水滴污染培养基．硝化细菌能够利用铵盐的氧化释放的能量合成自身的有机物，同时也可以为硝化细菌提供氮源．硝化细菌属于自养微生物，培养基中不需要进入碳源，从功能上看这种培养基属于选择培养基．
    （2）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水．实验组每个平板中的菌落数都超过了300，说明菌液浓度过大，需要进行适当的稀释处理．
    （3）探究弱酸弱碱条件下硝化细菌对铵盐转化能力的大小属于中，需要设置酸性、中性、碱性三组进行相互对照，所以取含铵盐的液体培养基均分成3等分，其PH值可依次调节为5、7、9（或6、7、8），培养相同的时间后，可通过测定培养基中的铵盐的剩余量来判断硝化细菌分解能力的大小．
    故答案为：
    （1）高压蒸汽    防止冷凝形成水滴污染培养基   氮源    选择
    （2）无菌水    适当的稀释
    （3）5、7、9（或6、7、8）铵盐的剩余量

    点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够掌握无菌技术的主要内容，掌握选择培养基的选择作用，并具有一定的实验设计能力，难度适中．

    练习册系列答案
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    15．图1是利用两种不同生物技术将小鼠培育成大鼠的过程．图2中质粒是基因工程中常用的质粒pIJ702，其中tsr为硫链丝菌素抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、Pst I、SacⅠ、SphⅠ在pⅠJ702 上分别只有一处识别序列．

    表1
     pIJ702pZHZ8
    BglⅡ5.7kb6.7kb
    ClaⅠ5.7kb2.2kb，4.5kb
    Pst I 5.7kb1.6kb，5.1kb
    （1）图1中应用到的生物工程技术有核移植技术、转基因技术、胚胎移植技术、动物细胞培养技术等．c分子称为达载体（重组DNA分子或重组质粒），其上的生长激素基因表达产物的受体分布在丁鼠的全身细胞的细胞膜上．
    （2）若大鼠甲和大鼠乙体内X染色体上均带有某种致病基因，则培育出的大鼠丙和大鼠丁携带致病基因的是（不考虑基因突变）大鼠丙携带，丁不携带．
    （3）以SacⅠ和SphⅠ同时切割大鼠生长激素基因和质粒PIJ702，获取的目的基因去置换PIJ702上0.4kb的片段，构成重组质粒pZHZ8．上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中．由此判断目的基因的片段长度为1.4kb．参照表1数据，如果用PstⅠ和Cla l同时酶切重组质粒pZHZ8，则两种酶可将pZHZ8切成4个片段．
    （4）重组质粒pZHZ8上的标记基因是tsr基因（硫链丝菌素抗性基因），在含硫链丝菌素固体培养基上培养后，筛选过程中要淘汰黑色的菌落．

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