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    13．金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，降低观赏价值．科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育出了抗枯萎病的新品种．请据图回答：

    （1）获得②的方法有从基因文库中获取、PCR技术扩增和人工合成；①和②结合能形成③的过程叫基因表达载体的构建，一般用相同的限制酶分别处理载体和含有目的基因的外源DNA分子，以便得到相同的粘性末端，能连接相同粘性末端的酶是DNA连接酶．构建形成的③必须含有目的基因、启动子、标记基因和终止子．
    （2）将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，要将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA中，目的基因能否在受体细胞中稳定的遗传和表达的关键是转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，可通过DNA分子杂交技术的方法检验受体细胞基因中是否有目的基因．
    （3）在⑤→⑥过程中，获得抗病基因的金茶花细胞将经历脱分化和再分化过程后才能形成⑦，该过程需要生长素和细胞分裂素的诱导，通过转基因方法获得的抗体病金茶花，将来产生的配子中是否一定含有抗病基因？不一定．

    分析 分析题图：图示是用转基因方法培育出抗枯萎病新品种的过程，其中①表示质粒；②表示目的基因；③表示基因表达载体；④表示转基因金茶花植株．

    解答 解：（1）获取目的基因的方法包括从基因文库中获取、PCR技术体外扩增和人工合成；将②连接到①上并形成③过程叫基因表达载体的构建，该过程需先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒，还需用DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒．基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、标记基因和终止子．
    （2）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，其原理是：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．目的基因能否在受体细胞中稳定的遗传和表达的关键是转基因生物的DNA上是否插入了目的基因；检测受体细胞基因中是否有目的基因常用DNA分子杂交技术．
    （3）将转基因受体细胞培育成转基因植株还需要采用植物组织培养技术，该技术包括脱分化和再分化两个步骤，这两个步骤都需要生长素和细胞分裂素的诱导．通过转基因方法获得的抗病金茶花可视为杂合子，其将来产生的配子中不一定含有抗病基因．
    故答案为：
    （1）从基因文库中获取   PCR技术体外扩增      基因表达载体的构建    含有目的基因的外源DNA分子    DNA连接酶    启动子    标记基因
    （2）农杆菌转化法     T-DNA       转基因生物的DNA上是否插入了目的基因     DNA分子杂交技术
    （3）脱分化     再分化     生长素和细胞分裂素      不一定

    点评 本题结合转基因金茶花的培育过程图解，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的具体操作步骤；识记植物组织培养的原理及过程，能结合图解准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．

    练习册系列答案
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