Question

【题目】回答下列(一)、(二)小题：

(一)下面是有关食醋制作的实验，请回答：

(1)若以大米为原料经三步发酵可以制作食醋：

第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成________(填中间产物)，然后进一步水解成葡萄糖，这一过程可用________(填淀粉指示剂)来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。

第二步：用酵母菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是_____________________________________________________。

第三步：用________菌将乙醇转化成乙酸，这一过程是否需要氧气：________。

(2)若以葡萄为原料，将葡萄榨成汁后装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如下图所示。

则图中实验操作的错误之处是____________________________________________________。

(3)借助显微镜对酵母菌进行计数，下列会影响计数准确性的操作是________。

A．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的酵母菌数

B．用滴管取1滴培养液到血细胞计数板的方格区，盖上盖玻片，进行计数

C．如果酵母菌有芽体，因没有分离成两个子体，要以一个计数

D．方格内酵母菌总数量应不少于300个

(二)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

请回答：

(1)htPA基因与质粒通常用同种__________________切割，再通过__________酶连接构建重组质粒。

(2)为获取更多的卵(母)细胞，通常对供体母羊进行____________处理。卵(母)细胞在体外培养成熟，再与经过____________处理的精子完成受精作用。体外受精卵还需经过____________培养，然后再移植，代孕产仔。最后检测筛选，下列检测结果中，作为培育成功标志的是________。

A．体细胞中检测到htPA基因

B．体细胞中检测到htPA基因的mRNA

C．羊奶中检测到htPA

D．羊奶中检测到蛋白质含量明显增加

(3)若快速繁殖转htPA基因羊，下列胚胎工程技术中没有直接涉及的是________。

A．胚胎体外培养 B．胚胎移植

C．胚胎分割 D．胚胎干细胞培养

Answer 1

【答案】 糊精 KII2 发酵过程会产生大量的二氧化碳，使瓶内压力升高，若完全密闭，可能引起爆裂 醋化醋杆 是 未夹住发酵瓶的进气管 C 限制性核酸内切酶 DNA连接 超数排卵 获能 (早期)胚胎体外 C D

【解析】试题分析：本题结合转htPA基因母羊的培育过程图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确答题。

（一）(1)第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成中间产物糊精，然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用KII2 来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。第二步：用酵母菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，该过程中除了产生酒精，还会产生大量的CO2，使瓶内压力升高，使瓶内压力升高而可能引起爆裂，因此操作玻璃发酵瓶不应完全密闭。

第三步：用醋酸菌将乙醇转化成乙酸，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此该过程需要消耗氧气。

（2）果酒发酵时需要无氧环境，因此甲图中的错误是未夹住发酵瓶的进气管。

（3）用血细胞计数板进行计数时，压在方格边上的酵母菌，只能计数相邻两边及其顶角的个体数，否则会产生误差，A错误；对酵母菌计数时，应该先震荡均匀，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，而不能直接将培养液滴到血细胞计数板的方格区，盖上盖玻片，进行计数，B错误；用血球计数板计数酵母菌数量时酵母菌的芽体也作为个体计数，会使实验所得到数值比实际数值偏大，因此酵母菌有芽体，没有分离成两个子体，要以一个计数，C正确；方格内酵母菌总数量大于300个，数量太多，细胞叠加在一起，会是读数带来误差，D错误。

（二）（1）目的基因和运载体需用同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）切割，产生相同的粘性末端，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵．采集的精子需要经过获能（处理），才具备受精能力。体外受精卵还需经过胚胎体外培养，然后再移植，代孕产仔。基因表达成功时可获得目的基因的产物，既在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA（或人组织纤溶酶原激活物），说明目的基因成功表达，故选C。

(3) 由于胚胎干细胞具有发育的全能性，因此可以利用胚胎干细胞快速培养繁殖转htPA基因羊，故选D。