Question

【题目】取同种生物的不同类型细胞，检测其基因表达，结果如图1，回答下列相关问题．

（1）基因1～8中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因，则该基因最有可能是基因 ．
（2）图所示细胞中功能最为近似的是细胞________
A.1与6
B.2与5
C.2与3
D.4与5
（3）判断图中细胞功能近似程度的依据是
（4）如图2为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图．图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0.7Kb），PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度．请据图回答：

①质粒A，C不能作为目的基因运载体的理由分别是、 ．
②将图中的目的基因与质粒B进行重组，需要用到酶．如果是两两重组，可能有种长度的重组结果．
③在基因工程实验的过程中，检查目的基因是否重组到质粒中，也是一个重要的一步．现使用酶切重组质粒，完全酶切后，进行电泳检测．若电泳图谱中出现长度为1.1kb和kb，或者kb和kb的片段，则基本上可以判断该重组质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）．
④下列关于基因工程常用运载体﹣﹣质粒的说法正确的是（多选）
A．质粒通常是来自于细菌的环状DNA分子，使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒上具有多种限制酶切点，以便于切割后与目的基因连接．没有限制酶就无法使用质粒运载体
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则．

Answer 1

【答案】
（1）2
（2）A
（3）表达的相同基因最多，差异表达的基因最少
（4）缺少标记基因；复制原点被限制酶切割；限制酶（PvuⅠ）和DNA连接酶；3；EcoRⅠ酶；5.6；3.1；3.6；ACD
【解析】解：（1）几乎所有细胞都含有核糖体，所以控制核糖体合成的基因几乎在所有细胞都表达，因此基因1～8中，2基因最可能是控制核糖体蛋白质合成的基因．（2）1和6细胞表达的基因最为相似，所以1和6细胞功能最为近似．（3）1和6细胞表达的相同基因最多，差异表达的基因最少，所以两者功能最为近似．（4）①由图可知，质粒A中缺少标记基因，质粒C中的复制原点被酶切割，所以A、C不能作为运载体．②由图可知，获取目的基因使用的限制酶是PvuⅠ，所以切割质粒B也用该限制酶，同时目的基因与运载体连接的时候还需要DNA连接酶．用DNA连接酶连接时，可能出现质粒环化、目的基因环化、形成重组质粒，有3种长度的结果．③质粒长度为2.7kb，目的基因长度为4.0kb，所以重组质粒长度为6.7kb，出现长度为1.1kb，则使用EcoRⅠ酶切割的，另一个长度为5.6kb，若目的基因重组时倒置，可形成3.1kb和3.6kb的片段．④A、质粒通常是来自于细菌的环状DNA分子，使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解，A正确；
B、质粒运载体自身也能进入细胞，B错误；
C、质粒上具有多种限制酶切点，以便于切割后与目的基因连接．没有限制酶就无法使用质粒运载体，C正确；
D、质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则，D正确．
故选：ACD．
所以答案是：（1）2（2）A（3）表达的相同基因最多，差异表达的基因最少（4）①缺少标记基因 复制原点被限制酶切割②限制酶（PvuⅠ）和DNA连接酶 3③EcoRⅠ酶 5.6 3.1 3.6 ④ACD
【考点精析】关于本题考查的基因工程的原理及技术，需要了解基因工程的原理是利用DNA重组技术才能得出正确答案．