[题目]豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖.研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因猪.主要流程如下图.图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子.neo为新霉素抗性基因.请回答下列问题:(1)PCR过程中.温度降低到55℃的目的是 .(2)步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是 .(3)进行早期胚胎培养时.通常� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图，图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题：

（1）PCR过程中，温度降低到55℃的目的是_______________________________。

（2）步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。

（3）进行早期胚胎培养时，通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养，其中CO2的主要作用是____________________；另外，需定期更换培养液，目的是___________________。

（4）步骤⑥中，通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。

（5）与饲养普通猪相比，饲养转基因猪的优势是____________________________。

【答案】两种引物通过互补配对与两条单链DNA结合使manA基因能在唾液腺细胞中旺盛表达并分泌维持培养液的pH 清除代谢废物，（防止细胞代谢产物积累造成危害），补充营养物质桑椹胚或囊胚转基因猪可分泌甘露聚糖酶，促进消化豆科植物饲料，（以提高饲料的利用率，）降低饲养成本

【解析】1.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：a.模板DNA经加热至93℃左右，使模板DNA双链解离，使之成为单链，以便它与引物结合；b.温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；c. DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条子链。2.目的基因的插入位点在启动子和终止子之间，以利于目的基因的表达。

（1）PCR技术中先用高温使DNA中的氢键断裂，形成单链，再将温度降低到55℃，使引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。

（2）PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，将目的基因即manA基因插入PSP后，可使manA基因能在唾液腺细胞中旺盛表达，并能随着唾液分泌出来。

（3）早期胚胎培养的气体环境：O2：95%；CO2：5%；其中CO2维持培养液的pH。由于细胞代谢消耗营养物质，并产生有害代谢产物，因此需定期更换培养液，以清除代谢废物，补充营养物质。

（4）步骤⑥为胚胎移植，胚胎移植入子宫时，妊娠成功率最高为桑椹胚或囊胚。

（5）转基因猪可分泌甘露聚糖酶，分解豆科植物细胞壁中的甘露聚糖，促进消化豆科植物饲料，（以提高饲料的利用率，）降低饲养成本。

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