Question

【题目】今年非洲猪瘟导致大量生猪死亡，通过克隆猪来给生猪养殖户提供猪仔是一条值得探索的途径。早期胚胎细胞异常凋亡是目前克隆猪成功概率较低的主要原因，Bcl-2基因是细胞调亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答下列问题

（1）图中应选择减数第二次分裂中期的卵母细胞进行核移植，原因是_______________，为了保证正常的二倍体核型，使用的良种猪体细胞一般都选择__________代以内的细胞。

（2）图中X过程使用的酶是_______________，用PCR扩增Bcl-2基因。该技术的前提是要有一段已知__________________。根据这一序列设计合成引物，PCR扩增过程中使用的酶是_______________。

（3）在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2的分子数，从而反映出_______________________。

（4）胚胎移植中，应选择有__________________的个体作为受体母猪，并对受体母猪进行______处理。

Answer 1

【答案】减数第二次分裂中期的卵母细胞内含有动物生长发育的全部信息及营养，有助于动物细胞核全能性的表达 10 逆转录酶(反转录酶) 核苷酸序列 Taq酶 Bcl-2基因的转录水平 健康体质和正常繁殖能力 同期发情

【解析】

分析题图：图示为克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程图，首先采用核移植技术，即将良种猪体细胞核移植到去核卵细胞中形成重组细胞；然后采用早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；X表示以mRNA为模板逆转录形成cDNA的过程。

（1）减数第二次分裂中期的卵母细胞内含有动物生长发育的全部信息及营养，有助于动物细胞核全能性的表达，所以选择该时期的卵母细胞进行核移植；由于10代以内的细胞可保证正常的二倍体核型，因此使用的良种猪体细胞一般都选择10代以内的细胞。

（2）图中X表示以mRNA为模板逆转录形成cDNA的过程，需要逆转录酶；从基因组数据库中查询Bcl-2基因的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成引物用于PCR扩增；PCR扩增过程中由于是在高温环境中进行DNA的复制所以需要Taq酶。

（3）在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数，由于mRNA是通过转录形成的，因此这能反映出Bcl-2基因的转录水平。

（4）胚胎移植中，应选择有健康体质和正常繁殖能力的个体作为受体母猪，并对受体母猪进行同期发情处理。