Question

【题目】在药品生产中，人们逐步利用基因工程技术生产出如干扰素，白细胞介素，凝血因子等各种高质量低成本的药品，请分析回答：

(1)在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中，一般要用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶，其中限制酶切割的是___________________键,其特点是___________________________。

(2)将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后，能在细菌细胞内直接合成“某激素”，则该激素在细菌体内的合成包括______________________和_________________两个阶段。

(3)基因工程形成工程菌的遗传学原理是______________________________。

(4) 基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技术是______________________；其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是____________________________；最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是__________________________________________。

(5)为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过某种技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物（单位bp）	第二步水解	产物（单位bp）
	A酶切割	1900	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1700 200
		1500		800 700
		1600		1100 500

由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。

Answer 1

【答案】 磷酸二酯键 只能识别特定的DNA序列,并在两个特定的脱氧核苷酸之间切割 转录 翻译 基因重组 DNA分子杂交技术 采用分子杂交技术 抗原—抗体杂交 2 3

【解析】试题分析：制性核酸内切酶是可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶，简称限制酶。由表格分析可知A酶切割后有3段产物，说明酶A有2个切割位点，A酶切割的每一段产物，能被B酶切割位2段产物，说明每一段产物酶B有1个切割位点，因此说明酶B有3个切割位点。

（1）限制酶切割的是磷酸二酯键，其特点是只能识别特定的DNA序列，并在两个特定的脱氧核苷酸之间切割。

（2）将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后，能在细菌细胞内直接合成“某激素”，说明该激素的化学本质为蛋白质，蛋白质的合成包括转录和翻译两个阶段。

（3）基因工程形成工程菌的遗传学原理是基因重组。
（4）基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技术是DNA分子杂交技术；其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用分子杂交技术；最检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是抗原-抗体杂交。

（5）由实验可知，A酶切割后形成3段产物，所以有2个识别位点，被A酶切割后的3段产物，被B酶切割后形成6段，所以酶B的识别序列有3个。