Question

8．根据所学知识回答问题：
（1）基因工程中基因表达载体除包括目的基因外，还必须有启动子、终止子及标记基因等．
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA中．植物组织培养的主要原理是植物细胞具有全能性，具体过程是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过脱分化产生愈伤组织，最终形成完整的植株．
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内．
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项）物质循环再生原理、物种多样性原理、（协调与平衡原理、整体性原理、系统学与工程学原理）．

Answer 1

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、植物组织培育的具体过程为：外植体$\stackrel{脱分化}{→}$愈伤组织$\stackrel{再分化}{→}$新植体．

解答 解：（1）基因表达载体包括标记基因、启动子、终止子、目的基因、复制原点等．
（2）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．植物组织培养的主要原理是植物细胞具有全能性，具体过程是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过脱分化产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株．
（3）胚胎移植的最佳时期是桑椹胚或囊胚阶段．
（4）生态工程遵循的基本原理包括：物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理．
故答案为：
（1）启动子、终止子
（2）T-DNA    染色体DNA      全能性      无菌      脱分化
（3）桑椹胚或囊胚
（4）物质循环再生原理、物种多样性原理、（协调与平衡原理、整体性原理、系统学与工程学原理）

点评 本题考查基因工程、细胞工程、胚胎工程和生态工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作步骤及各操作步骤中的相关细节；识记植物组织培育的原理及过程；识记胚胎移植的基本程序；识记生态工程的原理，能结合所学的知识准确答题．