Question

研究发现：端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用，端粒酶是一种逆转录酶，能延长缩短的端粒(缩短的端粒使细胞复制能力受限)，从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞的增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。

方法思路：

①构建干扰质粒________(插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基的mRNA的干扰序列)和对照质粒PSG－CTR(插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列)。

②将空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒和对照质粒分别感染肝癌细胞。

③一段时间后观察或检测细胞的________。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线，结果如图所示。

请据图回答下面的问题。

(1)完成实验步骤中的空格：①________；③________。

(2)在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用________培养基进行筛选，鉴定后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有________。

(3)端粒酶可以通过以自身的________为模板，________为原料来合成端粒DNA。

(4)请根据题意分析实验结果并得出结论。

Answer 1

【解析】　(1)由曲线图或柱形图即可完善实验步骤。(2)基因工程用选择培养基进行筛选鉴定。(3)端粒酶是一种逆转录酶，能进行逆转录。(4)从柱形图可知，PSG－AS导入肝癌细胞发挥作用后，端粒酶的活性降低，细胞凋亡率升高；从曲线图可知，PSG－AS导入肝癌细胞发挥作用后，细胞生长受抑制。说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性的方法能较好地抑制肿瘤细胞。

【答案】　(1)①PSG －AS　③端粒酶的活性、凋亡情况、生长情况　(2)选择　标记基因　(3)RNA　4种脱氧核苷酸　(4)从结果可知PSG－AS导入肝癌细胞发挥作用后，端粒酶的活性降低，细胞凋亡率升高，细胞生长受抑制，说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性的方法，能较好地抑制肿瘤细胞。