Question

【题目】下图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：

(1)基因表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、__________________、终止子和复制原点等。Gfp基因整合到受体细胞中的染色体DNA上，能使目的基因的遗传特性得以__________________________________，从而实现________过程。

(2)图中载体上的Neo基因是一种抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418是一种抗生素(对细胞有毒害作用)，添加G418的目的是__________________________________。

(3)图中所用的胚胎干细胞来自于________________________________。

(4)图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的________位置，图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素进行________处理。

(5)可以使用____________________方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。

Answer 1

【答案】 标记基因，启动子 维持稳定和表达 转化 鉴定和筛选出导入目的基因的胚胎干细胞 早期胚胎或原始性腺 内细胞团 同期发情 抗原-抗体杂交

【解析】试题分析：分析题图：图示为绿色荧光小鼠制备流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示将表达载体导入胚胎干细胞；③表示胚胎干细胞的体外培养过程；④表示冲卵，即冲出胚胎的过程；⑤表示将胚胎干细胞团注入囊胚；⑥表示胚胎移植过程。

（1）基因表达载体的组成包括目的基因（绿色荧光蛋白基因Gfp）、标记基因、启动子、终止子和复制原点等。Gfp基因整合到受体细胞中的染色体DNA上，能使目的基因的遗传特性得以维持稳定和表达，从而实现转化过程。

（2）步骤③所用的G418是一种抗生素，其作用是筛选出导入目的基因的胚胎干细胞。

（3）胚胎干细胞来自于早期胚胎或原始性腺。

（4）囊胚包括滋养层细胞和内细胞团细胞，其中滋养层细胞将发育成胎盘和胎膜，而内细胞团细胞将发育成各种组织，因此图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的内细胞团位置；图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素处理，目的是进行同期发情处理。

（5）从分子水平上检测小鼠是否存在绿色荧光蛋白，可采用抗原-抗体杂交法。