Question

20．如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程图，请据图回答下列问题．

（1）②过程用到的工具有限制酶、DNA连接酶．
（2）③过程常用的具体方法是显微注射法．
（3）重组质粒中除含有目的基因外还要含启动子、终止子、复制原点、标记基因等．
（4）图示过程中涉及的具体技术手段有动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植．

Answer 1

分析 据图分析，①表示获取绿色荧光蛋白基因，②表示基因表达载体的构建，③表示将目的基因导入受体细胞，④表示取供体细胞的细胞核，⑤去除卵母细胞的细胞核，⑥表示核移植，⑦表示早期胚胎的培养，⑧表示胚胎移植．

解答 解：（1）②过程表示基因表达载体的构建，首先需要用同一种限制酶切割目的基因和质粒，然后利用DNA连接酶构建重组质粒．
（2）③过程表示目的基因导入受体细胞，动物基因工程中常采用显微注射法．
（3）一个完整的基因表达载体除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有复制原点、启动子、终止子和标记基因．
（4）分析图解可知，需要对成纤维细胞进行动物细胞培养；利用细胞核移植技术构建重组细胞；重组细胞需要经过早期胚胎培养获得早期胚胎；最后需要利用胚胎移植的首先将早期胚胎移植进入受体母猪子宫内．
故答案为：
（1）限制酶、DNA连接酶
（2）显微注射法
（3）启动子、终止子、复制原点、
（4）基因工程、细胞核移植、胚胎移植

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，能准确判断图中各过程的含义，再结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．