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    【题目】某转基因牛的生产技术流程如图。请回答：

    （1）利用过程①方法构建的基因文库与基因组文库相比,最显著的特征是不含___________。采用PCR技术大量扩增此目的基因的前提是___________，以便合成引物;扩增过程中温度呈周期性变化，冷却后继续加热到70-75℃的目的是______________________。

    （2）转入生长激素基因的牛可通过乳腺细胞分泌乳汁来生产人生长激素，过程②中，将目的基因与____的启动子等调控组件重组在一起构建重组质粒，通过___________________法导入受精卵中，然后利用胚胎工程的___________(答出2项)技术手段获得转基因牛。

    （3）该转基因牛进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产人的生长激素，因而称作___________反应器。若该转基因牛的乳汁中并未含有人的生长激素，可能的原因是______________________。

    【答案】内含子和启动子 要有一段巳知目的基因的核苷酸序列使 Taq酶从引物起始进行互补链的合成乳腺蛋白基因显微注射早期胚胎培养、胚胎移植乳腺生物（乳房生物）目的基因未成功导入（或导入的目的基因未能准确表达）

    【解析】

    据图分析，图示为利用基因工程生产转基因牛的过程，涉及到的技术有基因工程、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；图中过程①表示利用反转录法获得目的基因（生长激素基因）的过程，过程②表示构建基因表达载体的过程，是基因工程的核心步骤，基因表达载体的组成成分包括启动子、终止子、目的基因、标记基因等。

    （1）真核基因的结构包括非编码区和编码区，编码区包括外显子和内含子，非编码区的上游含有启动子、下游含有终止子。利用过程①反转录法获得的目的基因只有外显子对应的片段，因此利用该方法获得的基因文库与基因组文库相比，没有内含子和启动子。采用PCR技术扩增目的基因的前提条件是要有一段巳知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物；扩增过程中，冷却后继续加热到70-75℃的目的是使 Taq酶从引物起始进行互补链的合成。

    （2）根据题意分析，转入生长激素基因的牛可通过乳腺细胞分泌乳汁来生产人生长激素，所以应该将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子、终止子等调控组件重组在一起构建重组质粒，再通过显微注射法将重组质粒导入受精卵中，然后利用早期胚胎培养技术形成早期胚胎，再利用胚胎移植技术等获得转基因牛。

    （3）由于可以通过转基因牛的乳汁生产人的生长激素，因此转基因牛可以称作为乳腺生物反应器；若该转基因牛的乳汁中并未含有人的生长激素，可能是因为目的基因未成功导入，也可能是因为导入的目的基因未能准确表达。

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