如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导入细菌B后,其上的基因能得到表达,探究:
(1)如何将目的基因和质粒相结合形成重组质粒(重组DNA分子)? 。
(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高;导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒A,只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的,反之则没有。使用这种方法鉴别的原因是 。
(3)若把通过鉴定证明导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养,会发生的现象是 。
(4)导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?
(1)①用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个有黏性未端的切口。②用同种限制酶切割目的基因,产生相同的黏性未端。③将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的DNA连接酶,使质粒与目的基因结合成重组质粒。
(2)普通质粒A和重组质粒都含有抗氨苄青霉素基因
(3)有的能生长;有的不能生长。导入普通质粒A的细菌能生长,因普通质粒A上有抗四环素基因;导入重组质粒的细菌不能生长,因为目的基因插在抗四环素基因中,使其结构被破坏。
(4)基因成功表达的标志是受体细胞通过转录和翻译过程合成出相应的蛋白质,即人的生长激素。
(1)形成重组质粒的过程:用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个有黏性未端的切口。→用同种限制酶切割目的基因,产生相同的黏性未端→将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的DNA连接酶,使质粒与目的基因结合成重组质粒。
(2)普通质粒A和重组质粒都含有抗氨苄青霉素基因,来鉴别有无质粒成功导入大肠杆菌细胞。
(3)导入普通质粒A的细菌能生长,因普通质粒A上有抗四环素基因;导入重组质粒的细菌不能生长,因为目的基因插在抗四环素基因中,使其结构被破坏,这称为“插入破坏”。
(4)基因成功表达的标志:体细胞通过转录和翻译过程合成出相应的蛋白质,即人的生长激素。
科目:高中生物 来源:河北省衡水中学2009—2010学年度第二学期期中考试高二生物试卷 题型:综合题
回答下列关于基因工程的问题:
如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导入细菌B后,其上的基因能得到表达,根据图示所给信息回答下列问题:
(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时,用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒,露出相同的黏性末端,将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的 ,使质粒与目的基因结合成重组质粒。
(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高;导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒;有的导入的是普通质粒A;只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:
将得到的细菌涂抹在一个含有 的培养基上,能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的,反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件 ; 。
(3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒,将得到的细菌涂抹在一个含有
的培养基上培养,若细菌 ,则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程,应该用 作为探针。
(4)使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,主要是借鉴 的途径。
(5)目的基因表达成功后,“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看,此变异属于
。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么? 。
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科目:高中生物 来源:2013届湖北省荆门市高二下学期期末质量检测生物试卷 (解析版) 题型:选择题
如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细
胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是
A.将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法
B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上,能生长的就是导入了重组质粒的细菌
C.将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上,能生长的就是导入了质粒A的细菌
D.目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
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科目:高中生物 来源:2013届山西省“晋商四校”高二下学期联考生物试卷(解析版) 题型:选择题
如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是
A.将重组质粒导入细菌B常用的方法是用Ca2+处理
B.将进行了导入处理后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上,不能生长的只是导入了重组质粒的细菌
C.将进行了导入处理后的细菌涂布在含有四环素的培养基上,能生长的只是导入了重组质粒的细菌
D.目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
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科目:高中生物 来源:2013届吉林省长春市高二下学期期初考试生物试卷(解析版) 题型:选择题
如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是
A.将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法
B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上,能生长的就是导入了质粒A的细菌
C.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上,能生长的只是导入了重组质粒的细菌
D.目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
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科目:高中生物 来源:河北省2009—2010学年度第二学期期中考试高二生物试卷 题型:综合题
回答下列关于基因工程的问题:
如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导入细菌B后,其上的基因能得到表达,根据图示所给信息回答下列问题:
(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时,用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒,露出相同的黏性末端,将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的 ,使质粒与目的基因结合成重组质粒。
(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高;导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒;有的导入的是普通质粒A;只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:
将得到的细菌涂抹在一个含有 的培养基上,能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的,反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件 ; 。
(3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒,将得到的细菌涂抹在一个含有
的培养基上培养,若细菌 ,则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程,应该用 作为探针。
(4)使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,主要是借鉴 的途径。
(5) 目的基因表达成功后,“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看,此变异属于
。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么? 。
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