Question

11．为了获得β-胡萝卜素产品，某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验． 请回答下列问题：
（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）．
（2）为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是抑制细菌（放线菌）生长．
（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
（4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在 3 块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是接种环温度过高，菌被杀死．
（5）为增加β-胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是有助于研磨充分；研磨时不需要 （填“需要”或“不需要”）添加 CaCO₃．
（6）胡萝卜素是橘（橙）黄色的结晶．从胡萝卜中提取胡萝卜素，常用亲脂性有机溶剂（或有机溶剂）作为溶剂，原因是胡萝卜素是脂类物质，易溶于有机溶剂．可以考虑采用萃取法提取胡萝卜素．其提取效率主要取决于有机溶剂（萃取剂）的性质和使用量，同时还受原料颗粒大小、含水量等条件的影响．
（7）提取的胡萝卜素粗品可通过纸层析进行鉴定，此过程常用石油醚作溶剂．在鉴定过程中需要用标准样品对照．

Answer 1

分析 1、发酵生产胡萝卜素时的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法．微生物的营养物质主要有碳源、氮源水和无机盐等．植物有效成分的提取主要有蒸馏法、压榨法和萃取法．
2、胡萝卜素的化学性质稳定，不溶于水，易溶于石油醚等脂溶性有机溶剂，常采用萃取法提取．提取流程为：胡萝卜-粉碎-干燥-萃取-过滤-浓缩-胡萝卜素-鉴定．胡萝卜素常用纸层析法进行鉴定．

解答 解：（1）灭菌常用方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等，培养皿常用高压蒸汽灭菌、干热灭菌．将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎避免灭菌后的再次污染．
（2）青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌的繁殖期起杀菌作用，因此添加青霉素可抑制细菌的生长．
（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行．
（4）三块平板有两块平板长有菌落，说明含有菌株并可在培养基上生长；而其中一块未见菌落，说明菌株死亡．因此，应在接种过程中接种环灼烧后未冷却或未足够冷却，使菌株因温度过高被杀死．
（5）石英砂有助于研磨充分．CaCO₃用于中和酸性物质，β-胡萝卜素较耐酸，因此不需添加．
（6）胡萝卜素是橘（橙）黄色的结晶．从胡萝卜中提取胡萝卜素，常用亲脂性有机溶剂（或有机溶剂）作为溶剂，原因是胡萝卜素是脂类物质，易溶于有机溶剂．可以考虑采用萃取法提取胡萝卜素．其提取效率主要取决于有机溶剂（萃取剂）的性质和使用量，同时还受原料颗粒大小、含水量等条件的影响．
（7）提取的胡萝卜素粗品可通过纸层析进行鉴定，此过程常用 石油醚作溶剂．在鉴定过程中需要用 标准样品对照．
故答案为：
（1）干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）  
（2）抑制细菌（放线菌）生长  
（3）酒精灯火焰       
（4）接种环温度过高，菌被杀死
（5）有助于研磨充分  不需要
（6）橘（橙）黄　亲脂性有机溶剂（或有机溶剂）　胡萝卜素是脂类物质，易溶于有机溶剂   萃取　有机溶剂（萃取剂）的性质和使用量　
（7）纸层析   石油醚   标准样品

点评 本题考查微生物的培养与分离的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力．