Question

3．农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤．为修复被污染的土壤，可按图1程序选育出能降解该除草剂的细菌．已知该除草剂（含氮有机物）在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明．

（1）微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心是无菌操作，应该在酒精灯火焰旁完成．图中B、C所示的接种方法是平板划线法目的是将聚集的菌种逐步分离经培养，在划线的末端出现单个菌落，表明菌已分离．对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置．
（2）在选育过程中，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一氮源的培养基上．从功能上讲，该培养基属于选择培养基．为了筛选出高效的目的菌，可比较单菌落周围透明圈的大小．实验结果如图2显示的A～E五种菌株中，E是最理想菌株．
（3）若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是稀释涂布平板法．对分离的细菌数目统计时，统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少．
（4）实验结束后实验材料及用具需要灭菌，实验操作者的双手需要进行清洁和消毒．

Answer 1

分析 1、消毒和灭菌：

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

2、分析题图：该实验是从土壤中筛选分离能降解除草剂的微生物的过程．该实验要将土壤稀释处理，以除草剂为唯一氮源的培养基筛选土壤微生物，以菌落计数法进行统计计数．

解答 解：（1）微生物接种技术的核心是无菌操作，应该在酒精灯火焰旁完成．图中B、C表示平板划线法对微生物进行接种，目的是将聚集的菌种逐步分离．经培养，在划线的末端出现单个菌落，表明菌已分离．对培养基进行灭菌常采用高压蒸汽灭菌法灭菌．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，以防止冷凝水污染培养基．
（2）要选育出能降解该除草剂的细菌，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一氮源的固体培养基上．从功能上讲，该培养基属于选择培养基．为了筛选出高效的目的菌，可比较单菌落周围透明圈的大小，透明圈越大，说明其中的细菌降解除草剂的能量越强，因此图2显示的A～E五种菌株中，E是最理想菌株．
（3）若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用稀释涂布平板法．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于所产生的菌落可能是由两个或多个细胞形成的，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏低．
（4）实验结束后实验材料及用具需要灭菌，以防止污染环境，实验操作者的双手需要进行清洁和消毒．
故答案为：
（1）无菌操作      酒精灯火焰       平板划线法    分离    单个菌落    高压蒸汽灭菌    倒置     
（2）该除草剂      选择培养基    E
（3）稀释涂布平板法     少
（4）灭菌          消毒

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术，掌握消毒和灭菌的区别；识记接种微生物常用的方法，能结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．