Question

【题目】农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。请分析回答：

(1)微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心是_______。

(2) 在选育过程中，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一______的培养基上。通过比较单菌落周围__________的大小，可筛选出高效的目的菌。实验结果如右图显示的A～E五种菌株中，_______是最理想菌株。

(3) 若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_______。将lmL土壤溶液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度各在3个平板上分别接入0.lmL稀释液，经过适当培养后，6个平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5，空白对照组的平板上没有菌落，则每升土壤溶液中活菌数的理论值为_____________个。实际上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大，因为______________________。

Answer 1

【答案】无菌操作 氮源 透明圈 E 稀释涂布平板法 5.8106 当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

【解析】

1、选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长。分析题意可知，“该除草剂（含氮有机物）在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明”，说明培养基中是以除草剂为唯一氮源，并且降解后培养基出现透明圈。

2、每ml样品中的菌落数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下的平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)M代表稀释的倍数。

（1）微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心是防止杂菌污染（无菌操作）。

（2）该除草剂为含氮有机物，为了选育能降解该除草剂的细菌，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一氮源的培养基上。通过比较单菌落周围透明圈的大小，可筛选出高效的目的菌。E透明圈最大，降解除草剂的效果最好，故是最理想菌株。

（3）若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用稀释涂布平板法。微生物计数时需要选择菌落数在30300的进行记数，因此每升土壤溶液中活菌数的理论值为＝(59+57+58)÷3÷0.1×10×103＝5.8×106个。统计结果是用菌落数来表示的，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此实际上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大。