Question

红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O₂或CO₂，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白．请回答下列有关问题：
（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：

 

、

 

、

 

和

 

．
（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液．
①加入柠檬酸钠的目的是

 

②以上所述的过程即是样品处理，它包括

 

、

 

、

 

、透析．
（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离．
①透析的目的是

 

②透析的原理是

 

（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定．样品纯化的目的是

 

（5）提取细胞膜经常使用的材料是哺乳动物的成熟红细胞，原因是：

 

．

Answer 1

考点：蛋白质的提取和分离,细胞膜的制备方法

专题：

分析：本题是对血红蛋白的提取和分离的实验操作的考查，回忆血红蛋白的提取和分离的实验操作过程和原理，然后结合问题的具体要求进行解答．

解答： 解：（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步．
（2）样品处理过程分为红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析四步，实验前取新鲜的血液时，在采血容器中应预先加入柠檬酸钠，以防止血液凝固．
（3）血红蛋白的粗分离是通过透析完成的，透析的目的是除去分子量较小的杂质，原理是透析袋是半透膜，能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内．
（4）样品纯化是通过凝胶色谱法除去分子量大的杂蛋白．
（5）由于哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器，提取的细胞膜相对单一，只有细胞膜，因此取细胞膜经常使用的材料是哺乳动物的成熟红细胞．
故答案为：
（1）样品处理   粗分离  纯化   纯度鉴定
（2）①防止血液的凝固②红细胞的洗涤  血红蛋白的释放  分离血红蛋白溶液
（3）①将样品中分子量较小的杂质蛋白除去     ②透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内
（4）通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去
（5）因为哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器，这样提取的细胞膜相对较纯

点评：对血红蛋白的提取和分离的实验操作和原理的掌握是本题考查的重点．