Question

【题目】人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，可通过孕妇血液循环而随尿排出，利用HCG单克隆抗体诊断是否妊娠的灵敏度很高，回答下列问题:

(1)在人体内，糖蛋白可分布在体液、_____________等处，其中后者的糖蛋白具有______________ (至少答两点)作用。

(2)动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，利用了_______________。动物细胞融合可利用灭活的病毒，灭活是指_____________。

(3)在制备单克隆抗体过程中获得杂交瘤细胞其目的是解决_____________等问题。从杂交瘤细胞中筛选获得足够数量能分泌所需抗体的细胞需要进行______________。

(4)在体外培养杂交瘤细胞时，需要控制其培养条件，若采用无血清培养，则需要在基本培养基中添加___________。

Answer 1

【答案】细胞膜 润滑、识别（任答两点） 细胞膜的流动性 用物理或化学手段使病毒失去感染能力 淋巴细胞不能无限增殖、小鼠骨髓瘤细胞不能产生抗体 克隆化培养和抗体检测 一些已知的促进细胞生长和增殖的物质

【解析】

效应B淋巴细胞可产生单一抗体，但不能无限增殖，小鼠骨髓瘤细胞可无限增殖，通过动物细胞融合和动物细胞培养技术可生产单克隆抗体。

(1)在人体内，细胞膜的外表面存在糖蛋白，该部分糖蛋白可参与细胞间信息分子的识别，消化道、呼吸道表面的糖蛋白具有润滑、保护作用。

(2)动物细胞融合与植物原生质体融合均依赖于细胞膜的流动性。灭活病毒是用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但保留其抗原特性，使之可以介导细胞融合，但不会裂解细胞。

(3) 效应B淋巴细胞不能无限增殖、小鼠骨髓瘤细胞不能产生抗体，通过动物细胞融合获得的杂交瘤细胞具备二者优点，既能无限增殖，又可以产生单一抗体。获得足够数量能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，需要对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测。

(4)血清中存在促进细胞生长和增殖的物质，在体外培养杂交瘤细胞时，若采用无血清培养，则需要在基本培养基中添加一些已知的促进细胞生长和增殖的物质。

项目	第一次筛选	第二次筛选
筛选 原因	诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞	由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以需经过选择性培养
筛选 方法	用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长	用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群
筛选 目的	得到杂交瘤细胞	得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞